1、本實驗以血漿皮質(zhì)醇水平差異顯著的二花臉豬和皮特蘭豬為模型，描述肝臟糖異生功能相關的生理生化指標及肝臟糖異生途徑關鍵酶表達的品種特點，并分析與肝臟糖皮質(zhì)激素受體(Glucocorticoid receptor，GR)和11β-類固醇羥基脫氫酶1(11β-Hydroxysteroid dehydrogenase type1，11β-HSD1)表達的關系，以闡述糖皮質(zhì)激素在調(diào)控肝臟糖異生中的作用，并進一步檢測肝臟GR基因表達的品種差異是否與肝

2、臟GR基因5'-非翻譯區(qū)甲基化的狀況有關。 1.血液及肝臟生化指標的品種差異 二花臉豬肝糖原極顯著低于皮特蘭豬(P<0.01)；肝臟葡萄糖含量在品種間無顯著差異。二花臉豬血液乳酸顯著低于皮特蘭豬(P<0.05)，肝臟乳酸極顯著高于皮特蘭豬(P<0.01)。以上結(jié)果提示：二花臉豬乳酸代謝的能力可能高于皮特蘭豬。 2.豬肝臟糖異生關鍵酶基因表達品種差異 用相對定量REAL-TIME RT-PCR方法比較兩品種

3、豬肝臟糖異生關鍵酶基因mRNA的表達.結(jié)果表明：二花臉豬丙酮酸羧化酶(Pyruvate carboxylase，PC)mRNA表達極顯著高于皮特蘭豬(P<0.01)；品種間胞質(zhì)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Cytosolphosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK-C) mRNA表達無顯著差異，而二花臉豬線粒體磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Mitochondria phosphoenolpyruvate carbo

4、xykinase，PEPCK-M) mRNA表達顯著高于皮特蘭豬(P<0.05)。二花臉豬果糖-1，6-二磷酸酶(Fructose-1，6-bisphosphatase，F(xiàn)BPase) mRNA表達顯著高于皮特蘭豬(P<0.05)。葡萄糖-6-磷酸酶(Glucose-6-phosphatase，G-6-P) mRNA表達無品種間差異。以上結(jié)果提示：二花臉可能因PC，F(xiàn)BPase mRNA的高表達而有較強的糖異生能力.而乳酸是糖異生的主要

5、原料之一，提示肝糖異生途徑的增強可能是二花臉豬乳酸代謝能力強的原因之一。 3.豬肝臟皮質(zhì)醇含量的品種差異 為檢測血漿高水平的皮質(zhì)醇水平是否也導致肝臟皮質(zhì)醇水平較高，實驗采用二氯甲烷提取肝臟勻漿后放免測定肝臟皮質(zhì)醇含量。結(jié)果表明：兩品種豬肝臟皮質(zhì)醇含量無顯著差異。以上結(jié)果提示：可能是GR而非局部組織皮質(zhì)醇升高導致了肝臟糖異生關鍵酶表達的上升。 4.豬肝臟GR及11β-HSD1基因表達的品種差異 用相對定量R

6、EAL-TIME RT-PCR方法比較兩品種豬肝臟GR、11β-HSD1 mRNA表達，結(jié)果表明：二花臉豬GR及11β-HSD1 mRNA表達均顯著高于皮特蘭豬(P<0.05)。表明二花臉豬糖皮質(zhì)激素對肝臟的作用較強，可能是其肝臟糖異生關鍵酶表達升高的原因之一。 5.豬肝臟GR5'-UTR甲基化的品種差異 采用亞硫酸氫鹽測序法檢測GR5'-UTR區(qū)域DNA甲基化水平。結(jié)果表明：GR5'-UTR區(qū)域甲基化水平無顯著差異。以