1、目的：調(diào)查動(dòng)物源(寵物醫(yī)院、雞場(chǎng)、豬場(chǎng))、水源(閩江、小區(qū)池塘、學(xué)校魚塘、污水溝、下水道)耐萬古霉素腸球菌(Vancomycin resistant enterococcus VRE)的分離率，并對(duì)分離出的耐萬古霉素腸球菌進(jìn)行耐藥表型、基因型檢測(cè)及同源性研究，為指導(dǎo)獸醫(yī)臨床合理用藥及控制VRE向人類的傳播提供依據(jù)。 方法：采用瓊脂平板篩選法(ADSP法)分離耐萬古霉素腸球菌；根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的方法，以

2、微量肉湯稀釋法對(duì)分離出的30株動(dòng)物源及17株水源耐萬古霉素腸球菌進(jìn)行常用6種抗菌藥物的敏感性檢測(cè)；用多重PCR的方法同時(shí)進(jìn)行耐藥基因及腸球菌種水平的鑒定；用基因外重復(fù)回文序列-PCR(Repetitive extragenic palindromic elements-PCR)對(duì)篩選出的動(dòng)物源、水源耐萬古霉素腸球菌進(jìn)行分子分型及同源性分析。 結(jié)果： (1)從2個(gè)寵物醫(yī)院、3個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)及1個(gè)規(guī)模化雞場(chǎng)共420個(gè)樣本，篩選

3、出30株耐萬古霉素腸球菌；從閩江、生活小區(qū)池塘、學(xué)校魚塘、污水溝、下水道共200個(gè)樣本，篩選出17株耐萬古霉素腸球菌；不同豬場(chǎng)不同豬群的分離率以哺乳小豬最高，其次為保育小豬，不同水源的分離率以下水道最高，其次為污水溝；藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，動(dòng)物源、水源耐萬古霉素腸球菌均以土霉素的耐藥率最高，分別為93.3％和90％，均以氨芐西林的敏感率最高，分別為80％和88.2％。 (2)PCR檢測(cè)萬古霉素耐藥基因，30株動(dòng)物源耐萬古霉素腸球菌中

4、2株為VanA陽(yáng)性，12株VanB陽(yáng)性，7株VanC1陽(yáng)性，5株VanC2/3陽(yáng)性，4株未擴(kuò)增出Van基因；17株水源耐萬古霉素腸球菌中3株VanB陽(yáng)性，9株VanC1陽(yáng)性，5株VanC2/3陽(yáng)性，未擴(kuò)增出VanA基因。 (3)REP-PCR結(jié)果顯示，30株動(dòng)物源耐萬古霉素腸球菌共分為13個(gè)型，用A-M表示。A型分為A1-A6亞型，F(xiàn)型分為F1-F3亞型，J型分為J1-J3亞型，B、C、D、E、G、H、I、K、L、M沒有亞型。親

5、緣性分析，27、28、29號(hào)菌株具有100％的同源性，21和22、1和7、4和9、17和18、11和14、6和8等菌株間各自具有100％的同源性。17株水源VIE被擴(kuò)增出3-9條帶，大小在200bp-2000bp之間，共分為5個(gè)型，用A-E表示。A型分為A1-A3亞型，B、C、D、E沒有亞型。5種基因型以A1型為主。A1型有6株，A2型有1株，A3型有2株，B型有3株，D型3株，C、E型各一株。9、10、11、14、16與17號(hào)，5、1

6、2與13號(hào)，3、4與7號(hào)，1與15號(hào)，均各自有100％的同源性。 結(jié)論： (1)動(dòng)物源、水源均能分離出耐萬古霉素腸球菌，所分離的耐萬古霉素腸球菌對(duì)土霉素的耐藥率最高，對(duì)氨芐西林的敏感率最高，VanA基因介導(dǎo)高水平耐藥，VanC1、VanC2/3介導(dǎo)低水平耐藥，耐藥表型與基因型一致。 (2)同源性分析顯示，同一豬場(chǎng)分離的耐萬古霉素腸球菌具有較高的同源性，污水溝、下水道分離的水源耐萬古霉素腸球具有較高的同源性。在動(dòng)物