1、目前，殺蟲(chóng)劑和除草劑的大劑量應(yīng)用對(duì)環(huán)境造成了很大的破壞，對(duì)人類(lèi)的身體和生活質(zhì)量也造成了不好的影響。高等植物在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了復(fù)雜而精細(xì)的抗性反應(yīng)機(jī)制以抵抗昆蟲(chóng)的侵害。深入認(rèn)識(shí)植物對(duì)昆蟲(chóng)抗性的的分子機(jī)理將會(huì)為利用植物自身的抗性建立環(huán)境友好的控制農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)的策略提供理論依據(jù)。目前所鑒定的信號(hào)分子主要包括多肽信號(hào)分子系統(tǒng)素（Systemin）以及來(lái)源于不飽和脂肪酸的植物激素茉莉酸（JA），從分子水平對(duì)二者所介導(dǎo)的抗性反應(yīng)過(guò)程進(jìn)行遺傳學(xué)解析

2、，鑒定其中的重要組分（功能基因）并對(duì)其功能進(jìn)行深入研究。本研究?jī)?yōu)化了番茄遺傳轉(zhuǎn)化體系；同時(shí)利用反向遺傳學(xué)原理，構(gòu)建了LeJA2（Lycopersicon esclenrumjasmonic acid2）的過(guò)量表達(dá)載體和RNAi表達(dá)載體，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，獲得兩種類(lèi)型的轉(zhuǎn)基因苗，通過(guò)對(duì)兩種類(lèi)型的轉(zhuǎn)基因苗的性狀鑒定和PPO活性的測(cè)定，對(duì)LeJA2的功能進(jìn)行了初步的預(yù)測(cè)。主要研究的結(jié)果如下：
　　 1.建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的番茄

3、遺傳轉(zhuǎn)化體系
　　 對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的番茄轉(zhuǎn)化LeJA2基因系統(tǒng)進(jìn)行了優(yōu)化，研究了農(nóng)桿菌侵染時(shí)間、侵染溫度和侵染濃度三個(gè)因素對(duì)番茄愈傷組織形成的影響，尋求影響基因轉(zhuǎn)化的主要因素，獲得了較好的番茄農(nóng)桿菌侵染體系。
　　 2.獲得了轉(zhuǎn)基因番茄植株
　　 以子葉為轉(zhuǎn)化受體，使用高效農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化體系將LeJA2基因和LeJA2-RANi基因?qū)敕?，獲得了20株LeJA2過(guò)量表達(dá)的番茄抗性植株和35株LeJA2基因沉默

4、抗性植株，PCR檢測(cè)結(jié)果表明卡那抗性株均能擴(kuò)增出1050和517bp的目的條帶，證明基因已經(jīng)整合到番茄基因組中。
　　 3.功能驗(yàn)證
　　 對(duì)轉(zhuǎn)基因番茄植株P(guān)PO活性進(jìn)行了初步檢測(cè)。通過(guò)PPO活性測(cè)定結(jié)果得出：植株機(jī)械損傷處理前，過(guò)量表達(dá)LeJA2基因的轉(zhuǎn)基因植株P(guān)PO染色后呈現(xiàn)深褐色，而對(duì)照和轉(zhuǎn)LeJA2-RNAi基因植株P(guān)PO染色后仍然呈現(xiàn)正常的汁液的綠色。用剪刀進(jìn)行機(jī)械損傷后進(jìn)行PPO染色，LeJA2基因過(guò)量表達(dá)植