1、牛病毒性腹瀉（Bovine viral diarrhea，BVD）是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）引起的多癥狀、多宿主為特征的一種重要的傳染病。該病的隱性感染以持續(xù)感染和免疫耐受為特點，會持久帶毒、排毒，成為常在傳染源，是造成BVDV廣泛傳播的重要因素。若持續(xù)感染牛感染同源的CP型BVDV時可導(dǎo)致黏膜病，發(fā)生嚴重腹瀉，病死率幾乎100％，據(jù)統(tǒng)計全世界每年死于此病感染的牛不少于500

2、萬頭。隨著新疆養(yǎng)牛業(yè)規(guī)模不斷擴大，BVDV感染呈上升趨勢，如不采取相應(yīng)的措施，會造成嚴重的經(jīng)濟損失。目前還沒有關(guān)于應(yīng)用卵黃抗體（egg yolk antibodies，IgY）對BVDV引起的感染進行被動免疫治療的研究報道。因此，本研究主要通過將致細胞病變型（cytopathic，CP）BVDV標準毒和非致細胞病變型（ncytopathic，NCP）BVDV新疆分離株免疫產(chǎn)蛋雞，制備抗BVDV卵黃抗體，并對該卵黃抗體進行體內(nèi)、體外中和活

3、性研究，從而為防治本病提供新的思路和方法。 本實驗通過MDBK細胞增殖BVDV，收集病毒細胞培養(yǎng)物，利用PEG法濃縮得到純度較高的病毒，用免疫過氧化物酶單層實驗的方法，測定濃縮毒的毒價。繼而以濃縮的NCP型BVDV（新疆分離株）和CP型BVDV（標準毒）作為抗原免疫健康產(chǎn)蛋雞，收集雞蛋，用改良PEG6000法提取卵黃抗體。采用瓊脂擴散法和間接ELISA法測定IgY效價，用微量法測定所得卵黃抗體中和病毒效價。在臨床試驗中，選取12

4、頭BVDV隱性感染犢牛，用所制備的IgY進行治療，治療后再次用本實驗室建立的巢式RT-PCR進行檢測，統(tǒng)計陰性犢牛數(shù)，計算消除率。 研究結(jié)果顯示，瓊脂擴散法測定IgY最后一次免疫后14天的效價，抗NCP型BVDV和CP型BVDV的效價均為1：32，間接ELISA法測定抗NCP型BVDV效價為1：40000、CP型BVDV效價為1：32000，體外中和NCP型BVDV效價為1×10-3，三個月后再次檢測，卵黃抗體效價未見明顯下降；