1、水稻OsRacD是從雌雄蕊形成期幼穗中分離的小GTP結合蛋白Rho家族成員。已有的研究提示，該基篩選，獲得了一些潛在的互作蛋白編碼基因。本研究將對其中隆OsRhoGD12基因(AY364312)與OsRacD基因的相互作用進行鑒定。
　　運用實時定量PCR技術分析OsRacD與OsRhoGDI2基因在水稻生長發(fā)育不同階段的葉片以及雌雄蕊形成期幼穗中的表達，發(fā)現(xiàn)二者在所檢測的材料中廣泛表達，且具有相似的變化規(guī)律；同時二者在幼穗組織中

2、表達量最高，提示OsRacD與OsRhoGDI2基因可能存在協(xié)同表達的調控方式。
　　為鑒定OsRacD與OsRhoGDI2的相互作用關系，首先在酵母雙雜交系統(tǒng)中檢測野生型、激活型和失活型的OsRacD與OsRhoGDI2的相互作用，發(fā)現(xiàn)野生型和激活型的OsRacD都能與OsRhoGDI2結合，提示無論OsRacD是否活化，都可以與OsRhoGDI2發(fā)生相互作用。為了確定兩者結合的位點，基于序列比對的提示，對OsRhoGDI2進行

3、序列缺失后，檢測兩者的相互作用，發(fā)現(xiàn)只保留OsRhoGDI蛋白保守結構域不能介導二者的相互作用。進一步通過原核表達和純化，獲得了與GST標簽融合的OsRhoGDI2及其缺失突變體蛋白，采用GST pull down檢測與His6標簽融合的OsRacD的結合，結果與酵母雙雜交分析一致。
　　為了鑒定在植物細胞內OsRacD蛋白與OsRhoGDI2蛋白之間的相互作用，采用雙分子熒光互補技術，分別將OsRhoGDI2與熒光蛋白YFP基因