家蠶抗胰蛋白酶(SW-AT)基因可選擇性剪輯的初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、真核基因表達(dá)調(diào)控是生命科學(xué)研究的前沿和熱點(diǎn)。RNA的選擇性剪輯在真核基因表達(dá)調(diào)控中起著十分重要的作用。選擇性剪輯可使同一基因編碼出功能不同的蛋白,對(duì)滿足生物體復(fù)雜性所需蛋白的多樣性具有重要意義。mRNA前體的選擇性剪輯能夠精細(xì)協(xié)調(diào)基因的功能,高效調(diào)節(jié)基因的定量表達(dá)以及蛋白功能的多樣化,影響主要發(fā)育方向的決定,對(duì)細(xì)胞的分化、發(fā)育、生理功能和病理狀態(tài)都有重要意義。 家蠶是重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲,也是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的模式生物之一。家蠶屬于

2、鱗翅目昆蟲,其非特異性體液免疫的主要作用物質(zhì)是血液或黏液中的體液因子。而早在1990年,Hiroshi Takagi等人就已證實(shí)家蠶抗胰蛋白酶是一類重要的體液免疫因子,屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑,能夠抑制酚氧化酶的活性,可能作用于酚氧化酶的活性前體。 本文利用生物信息學(xué)軟件對(duì)家蠶抗胰蛋白酶基因的100條EST進(jìn)行分析與歸納,初步推測(cè)SW-AT基因存在四種不同剪輯方式。SW-AT基因四種不同剪輯方式均有10個(gè)外顯子和9個(gè)內(nèi)含子組成,只

3、有第9外顯子各不相同。根據(jù)SW-AT基因四種不同剪輯方式的核酸序列跨內(nèi)含子設(shè)計(jì)特異性引物,通過RT-PCR證實(shí)了四種不同剪輯方式的存在,并結(jié)合實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)這四種不同剪輯方式進(jìn)行了組織表達(dá)分布、表達(dá)時(shí)相及其在家蠶不同組織中表達(dá)量的研究,結(jié)果表明,SW-AT基因的四種不同剪輯方式在家蠶幼蟲和蛹各個(gè)組織均存在明顯的組織特異性;第一種剪輯方式的相對(duì)表達(dá)量最高,在幼蟲和蛹的脂肪體中,相對(duì)于1000個(gè)內(nèi)參Bm-Actin A3基因的拷貝數(shù)均

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