1、<p><b>　　本科畢業(yè)設(shè)計(jì)</b></p><p><b>　?。?0_ _屆）</b></p><p>　　茶樹精油在柑橘保鮮中的應(yīng)用</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級(jí) 食品質(zhì)量與安全

2、 </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　目錄</b></p&

3、gt;<p><b>　　1引言5</b></p><p><b>　　2材料和方法5</b></p><p><b>　　2.1 原料5</b></p><p><b>　　2.2試劑5</b></p><p><b>　

4、　2.3 儀器6</b></p><p>　　2.4 處理方法6</p><p>　　2.4.1人工病害接種試驗(yàn)方法6</p><p>　　2.4.2自然品質(zhì)試驗(yàn)方法6</p><p>　　2.4.3體外抑菌試驗(yàn)方法6</p><p>　　2.5測(cè)定指標(biāo)及方法7</p><p

5、>　　2.5.1人工病害接種試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)7</p><p>　　2.5.2自然品質(zhì)試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)7</p><p>　　2.5.3體外抑菌試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)7</p><p><b>　　3 結(jié)果分析7</b></p><p>　　3.1 茶樹油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌的控制效果7</p><

6、p>　　3.2茶樹油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)品質(zhì)的影響8</p><p>　　3.2.1茶樹油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)硬度的影響8</p><p>　　3.2.2茶樹油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可溶性固形物（SSC）的影響 9</p><p>　　3.2.3茶樹油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可滴定酸的影響 9</p><p>　　3.2.4 茶樹油

7、浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)失重率的影響10</p><p>　　3.3離體抑菌試驗(yàn)10</p><p><b>　　3.4討論11</b></p><p>　　3.4.1 茶樹油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌的控制效果11</p><p>　　3.4.2茶樹油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)品質(zhì)的影響11</p><

8、;p>　　3.4.3離體抑菌試驗(yàn)11</p><p><b>　　4結(jié)論12</b></p><p><b>　　5致謝13</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)14</b></p><p>　　摘要：本試驗(yàn)以砂糖橘為原料，研究了茶樹油浸泡處理對(duì)果實(shí)病害和

9、品質(zhì)的影響。分別以5ml/L,15ml/L,30ml/L濃度的茶樹油稀釋液對(duì)砂糖橘進(jìn)行5min的浸泡處理，晾干后放入保鮮袋置于20℃培養(yǎng)箱貯藏，定期測(cè)定失重率、硬度、可溶性固形物和可滴定酸含量的變化；同時(shí)，將部分砂糖橘進(jìn)行人工接種105CFU/mL 青霉孢子懸液，經(jīng)上述相同處理及貯藏條件，定期觀察其發(fā)病情況。另外，運(yùn)用體外試驗(yàn)研究不同茶樹油濃度處理對(duì)青霉菌絲生長(zhǎng)的影響。研究發(fā)現(xiàn)，茶樹油浸泡處理對(duì)保持砂糖橘的自然品質(zhì)有一定效果，并明顯抑制

10、人工接種青霉菌病斑的發(fā)生和生長(zhǎng)。體外試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)茶樹油能明顯抑制青霉的菌絲生長(zhǎng)，得到茶樹油對(duì)青霉菌的抑制中濃度( EC50 )為1 mL/L，最小抑菌濃度（MIC）為2.4 mL/L。</p><p>　　關(guān)鍵詞：砂糖橘；茶樹油；浸泡 ;病害；品質(zhì)控制；</p><p>　　Abstract: "Shatang" Mandarin was immersed in 5 m

11、l/L, 15 ml/L, 30ml/L dilution of tea tree oil respectivelyfor 5 minutes, dried in the open air and stored in the incubator under 20℃ and observed regularly to see its quality changes,such as Weightlessness rate, hardness

12、, soluble solids and contents of titration acid. It was also researched the effects of the same treatment on the "Shatang" Mandarin which was inoculated with 105CFU/mL Penicillium digitatum spores, meanwhile th

13、e inhibition of myceli</p><p>　　Keywords: Citrus; tea tree oil; soak; Diseases; Quality control; </p><p><b>　　1 引言</b></p><p>　　柑橘是我國(guó)南方主栽果樹之一，豐富的柑橘資源使柑橘成為我們主要的果品之一。柑橘果實(shí)色

14、香味優(yōu)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高[1,2]。我國(guó)柑橘成熟期集中，加上經(jīng)營(yíng)管理不善、運(yùn)儲(chǔ)設(shè)施技術(shù)不匹配，腐爛病菌的侵染，使采后貯藏腐爛嚴(yán)重 ，腐爛率較大，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重。柑橘的防腐保鮮過(guò)去主要采用化學(xué)保鮮，隨著病原菌抗藥性的逐漸增 加以及人們對(duì)果品質(zhì)量要求的不斷提高和環(huán)保意識(shí)的加強(qiáng)，人們已經(jīng)開始意識(shí)到化學(xué)殺菌劑的潛在危險(xiǎn)[3]。</p><p>　　植物精油是以自然界中植物的花朵、葉、枝、根、皮、樹膠、全草和果實(shí)為原料,經(jīng)水蒸氣蒸

15、餾法、壓榨法、吸收法或溶劑萃取法制取的一類能被嗅感嗅出氣味或味感品出香味的天然化合物。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者就植物精油在保鮮上的應(yīng)用研究日益增多，李鵬霞等[4] 報(bào)道丁香精油和丁香酚具有較強(qiáng)的保鮮作用，劉霞等[5] 研究了百里香精油與碳酸鈉結(jié)合對(duì)椏柑酸腐病的防治效果及品質(zhì)的影響。soller[6]采用肉桂提取物處理水果蔬菜，具有良好的保鮮效果，可明顯延長(zhǎng)貯藏期。利用各種植物精油來(lái)防御植物病原菌，保障果蔬品質(zhì)已經(jīng)越來(lái)越引起人們的興趣。而且不同

16、植物的提取物對(duì)不同病原菌具有不同程度的抗菌效果[7~9]</p><p>　　茶樹精油是由桃金娘科白千層屬灌木樹種互葉白干層的新鮮枝葉經(jīng)水蒸氣蒸餾得到的芳香精油。其組成十分復(fù)雜，是100多種組分的混合物[10]。近年來(lái)，茶樹精油抗菌作用的研究成為國(guó)際上的研究熱點(diǎn)。體外試驗(yàn)表明茶樹精油具有廣譜抗菌活性[11]。 臨床數(shù)據(jù)證明茶樹精油在處理痤瘡、口腔念珠菌病、清除甲氧西林耐藥性金葡菌方面有效[12]。因此茶樹精油可望

17、開發(fā)成為一種新結(jié)構(gòu)的抗菌劑。已有的研究表明茶樹精油中多種組分具有協(xié)同殺菌作用，主要以膜破壞劑的形式破壞微生物膜結(jié)構(gòu)的完整性進(jìn)而影響膜功能，使其具有廣譜的抗細(xì)菌 、清除耐藥菌－ 抗真菌、抗病毒等活性[13]，在日化、醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。但在農(nóng)業(yè)方面的應(yīng)用報(bào)道，特別是其作為病害抑制劑的研究報(bào)道很少 。所以砂糖橘及其病損害為對(duì)象研究茶樹精油于砂糖橘保鮮中的應(yīng)用具有前瞻性。</p><p>　　在果蔬保鮮應(yīng)用方

18、面,茶樹精油具有抗生物活性、能抑制多酚氧化酶的活性、能抑制呼吸作用、能維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性、能保持酶的活性等?？梢杂行У刈柚构卟珊笃焚|(zhì)的劣變，保持果蔬的營(yíng)養(yǎng)成分和新鮮度， 還對(duì)果蔬貯藏期間的各種生理生化變化有有效的抑抑制作用，廷長(zhǎng)果蔬的貯藏期，從而達(dá)到果蔬四季供應(yīng)的目的[14]。</p><p>　　在茶樹精油體外抑菌方面，茶樹精油以一種膜破壞劑的形式發(fā)揮作用，通過(guò)破壞膜結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)鉀離子泄漏，抑制細(xì)胞呼吸，刺

19、激細(xì)胞自溶，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)電子密度物質(zhì)損失，從而改變細(xì)胞形態(tài)學(xué)[15]。它對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、黑曲霉素[16]等有顯著的抗菌作用。茶樹精油對(duì)不同菌類的抗菌活性有差異，一般認(rèn)為對(duì)真菌的活性最強(qiáng)，其次為真菌樣酵母菌，對(duì)酵母菌的抗菌能力相對(duì)較弱[17]。此外，茶樹精油還對(duì)皮膚癬菌、絲狀真菌[18]、支原體[19]等多種微生物的生長(zhǎng)有抑制作用，其主要有效成分為松油烯一4一醇[20]。</p>&

20、lt;p>　　本文采用砂糖橘為原料，采用茶樹精油浸泡的的方法，研究了茶樹精油對(duì)砂糖橘病害和品質(zhì)的影響，具體分析了不同濃度茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘品質(zhì)（硬度、可溶性固形物、酸度、失重率）的影響，對(duì)人工接種病害的抑制效果。以及通過(guò)茶樹精油體外抑菌試驗(yàn),觀察茶樹精油的體外抑菌效果，評(píng)價(jià)精油的抑菌性能, 并作為精油的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)，為砂糖橘的生產(chǎn)加工提供理論上的指導(dǎo)研究，探究茶樹精油運(yùn)用于砂糖橘保鮮中的具體可行性，為茶樹精油的市場(chǎng)運(yùn)用

21、提供支持。</p><p><b>　　2材料和方法</b></p><p><b>　　2.1 原料</b></p><p>　　砂糖橘，試驗(yàn)選擇新鮮、飽滿圓潤(rùn)、外觀整齊、無(wú)受傷、無(wú)病害的果實(shí)。</p><p>　　茶樹精油 ，中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所提供。</p><

22、;p>　　病原菌：使用接種環(huán)從腐敗的砂糖橘果實(shí)中中挑取霉變組織接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基；使用平板劃線分離法，劃線分離單菌落，于25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6天，進(jìn)行分子鑒定，結(jié)果顯示為指狀青霉；用接種環(huán)挑取其中生長(zhǎng)較好的菌落進(jìn)行二次接種于平板培養(yǎng)皿，使用新鮮PDA培養(yǎng)基、25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，待用。</p><p><b>　　2.2試劑</b></p><p&g

23、t;　　鹽酸 分析純 杭州化學(xué)試劑廠</p><p>　　氫氧化鈉 分析純 蘭溪市第二化學(xué)試劑廠</p><p>　　95％乙醇 分析純 杭州長(zhǎng)征化工廠</p><p>　　溴甲酚綠 分析純

24、 上海試劑四廠昆山分廠</p><p>　　吐溫80 藥用級(jí) 青島美生源生物科技有限公司</p><p><b>　　2.3 儀器</b></p><p>　　電子分析天平 BP211D 德國(guó)塞多利斯股份有限公司</p><p

25、>　　電子天平 PT系列 常熟市意歐儀器儀表有限公司</p><p>　　雙人單面凈化工作臺(tái) SW-CJ-2D 蘇州凈化設(shè)備有限公司</p><p>　　高速組織搗碎機(jī) DS-1 上海標(biāo)準(zhǔn)模型廠</p><p>　　手持式折射儀 WZ-108

26、 上海科登精密儀器有限公司</p><p>　　磁力攪拌器 90-3 上海滬西分析儀器廠</p><p>　　雙頻超聲清洗機(jī) SB5200DTS 寧波新芝生物科技股份有限公司 </p><p>　　電熱干燥箱 CS101-1AB 重慶銀河實(shí)驗(yàn)儀器

27、有限公司</p><p>　　臺(tái)式酸度計(jì) PHS-3C 上海盛磁儀器有限公司</p><p>　　電熱恒溫水浴鍋 DK-S22 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司</p><p>　　摩爾元素型純水機(jī) 1820A 上海摩爾科學(xué)儀器有限公司</p><p&g

28、t;　　振蕩器 VORtx-5 海門市其林貝爾儀器制造有限公司 </p><p>　　質(zhì)構(gòu)儀 TAplus 北京微訊超技儀器技術(shù)有限公司</p><p>　　高壓蒸汽滅菌鍋 40BA 上海申安醫(yī)療器械</p>

29、<p>　　真空干燥箱 DZF－6030A 上海－恒科技有限公司</p><p>　　內(nèi)切式勻漿機(jī) XHF-1 寧波新芝生物科技有限公司</p><p>　　智能生化培養(yǎng)箱 DND-9162 寧波江南儀器廠</p><p>　　玻璃儀器氣流烘干器 O20

30、 鄭州杜甫儀器廠</p><p>　　電磁爐 SK2105 美的集團(tuán)</p><p><b>　　2.4 處理方法</b></p><p>　　2.4.1人工病害接種試驗(yàn)方法</p><p>　　從已腐敗的砂糖橘果實(shí)中提取指狀青霉菌病原體，使用

31、劃線分離法分離單菌落，再次接種于平板培養(yǎng)皿，使用PDA培養(yǎng)基、25℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6天以上，選用長(zhǎng)勢(shì)良好的菌株，制備成105 CFU/mL孢子懸浮液，備用。</p><p>　　挑選大小、形狀和成熟度近似的果實(shí)，用醫(yī)用酒精消毒，待酒精揮發(fā)后，采用果實(shí)針刺法對(duì)砂糖橘接種病原菌。先用滅菌鐵釘在果實(shí)赤道區(qū)域刺孔1個(gè)（深4 mm，直徑4 mm），然后用移液槍向每孔中定量注入105CFU/mL 的青霉病菌孢子懸液20uL，晾

32、干。晾干后分別用5ml/L，15ml/L,30ml/L的茶樹精油溶液浸泡處理，處理組共3組，每組10個(gè)砂糖橘，同時(shí)設(shè)置一人工接種病害空白對(duì)照組。將果實(shí)放入保鮮袋，保持85%—90%相對(duì)濕度，20℃恒溫箱內(nèi)貯藏。貯藏期間每天取樣觀察果實(shí)接種發(fā)病情況，至有果實(shí)開始發(fā)病的日期開始記錄數(shù)據(jù)，測(cè)定病斑直徑大小。</p><p>　　2.4.2自然品質(zhì)試驗(yàn)方法</p><p>　　根據(jù)前期試驗(yàn)所得的結(jié)

33、果，用含1%吐溫80的無(wú)菌水溶液分別配成含茶樹精油5ml/L，15ml/L,30ml/L的溶液。取經(jīng)過(guò)篩選的150個(gè)砂糖橘，分成3大組（每大組50個(gè)），將各大組砂糖橘分別以不同濃度的茶樹精油溶液浸泡處理5min,然后將果實(shí)在自然條件下通風(fēng)晾干，處理后放置于厚度為0.04mm 的聚乙烯袋中保濕但不封口，放置于恒溫箱(20℃)條件下貯藏相對(duì)濕度85%—90%。同時(shí)設(shè)置一品質(zhì)試驗(yàn)空白對(duì)照組。每隔一天進(jìn)行硬度、可溶性固形物、失重率、可滴定酸度方

34、面的測(cè)量研究。</p><p>　　2.4.3體外抑菌試驗(yàn)方法</p><p>　　分別把不同量的茶樹精油混勻至50℃左右的PDA培養(yǎng)基中，倒平板，制成茶樹精油含量分別為0，0.1ml/L，0.3 ml/L ，0.6 ml/L，1 ml/L，1.3 ml/L， 1.7 ml/L ，2 ml/L ，2.4 ml/L，2.7ml/L，3ml/L的含毒培養(yǎng)基。</p><p&

35、gt;　　在無(wú)菌條件下，取均勻布滿青霉菌絲的PDA培養(yǎng)基，用打孔器在生長(zhǎng)7d的菌落邊緣切取菌餅，用接種環(huán)轉(zhuǎn)移到含毒培養(yǎng)基中間。倒置培養(yǎng)皿，于25℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每天觀察菌落生長(zhǎng)狀況。待對(duì)照組中的菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿后，測(cè)量處理組和對(duì)照組菌落直徑。</p><p>　　2.5測(cè)定指標(biāo)及方法</p><p>　　2.5.1人工病害接種試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)</p><p>　　用直尺“十

36、字交叉法”每日測(cè)量病斑直徑，求取各組數(shù)據(jù)平均值。對(duì)比各組腐爛率100%砂糖橘的個(gè)數(shù)。</p><p>　　2.5.2自然品質(zhì)試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)</p><p>　　硬度：用刮片在果實(shí)最大的橫徑處選兩處分別切去0.5cm 果皮后，在去皮處用質(zhì)構(gòu)儀（探頭型號(hào)為直徑2mm的P/2探頭，分析軟件為Texture Exponent 32，測(cè)試速度1.00mm/sec，測(cè)試距5.000mm）測(cè)定每組果實(shí)。每

37、個(gè)砂糖橘在果實(shí)最大的橫徑處測(cè)定2次, 探頭插入水果時(shí)所受到的最大阻力(單位N) 定義為砂糖橘的硬度。每組共測(cè)10個(gè)果實(shí)，取其平均值。</p><p>　　可溶性固形物（SSC）含量：采用WZ-108手持式折射儀，在先前果皮刮片處取一滴汁液測(cè)量，得出每組砂糖橘數(shù)據(jù)，求各組數(shù)據(jù)的平均值。</p><p>　　可滴定酸：將每組砂糖橘用搗碎機(jī)打成勻漿，稱10g，加10ml水，放入75°C

38、的DK-8D電熱恒溫水槽中水浴30min，取出，定容到250ml，再用脫脂棉過(guò)濾，取50ml濾液，用0.1mol/L的氫氧化鈉滴定至終點(diǎn)為pH8.1。計(jì)算公式：</p><p>　　可滴定酸度（%）=C×V×K/V0×250/m×100%</p><p>　　其中 C-氫氧化鈉的濃度，0.1mol/L</p><p>　　

39、V-PH為8.1時(shí)滴定的時(shí)間，L</p><p>　　K-換算成檸檬酸的系數(shù)，0.07</p><p>　　V0-滴定時(shí)的樣液體積，ml</p><p>　　250-定容時(shí)的體積，ml</p><p>　　m-稱量的勻漿的重量</p><p>　　失重率：用電子天平對(duì)水果的質(zhì)量進(jìn)行測(cè)量，并記錄，求其各組平均值進(jìn)行分析。

40、 </p><p>　　失重率=（砂糖橘原重- 砂糖橘貯藏一定時(shí)間后的重量）／砂糖橘原重×100%。</p><p>　　2.5.3體外抑菌試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)</p><p>　　計(jì)算處理組對(duì)真菌生長(zhǎng)的抑制百分率，計(jì)算公式為抑制率（%）=（對(duì)照組菌落的平均直徑- 處理組菌落的平均直徑）/ （對(duì)照組菌落的平均直徑- 菌餅直徑） × 100%。</p

41、><p><b>　　3 結(jié)果分析</b></p><p>　　3.1 茶樹精油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌的控制效果</p><p>　　由圖5,和6中數(shù)據(jù)可見，精油的抑菌效果主要由兩部分?jǐn)?shù)據(jù)體現(xiàn)，即前期砂糖橘的病斑直徑大小和后期個(gè)體砂糖橘腐爛率達(dá)100%的個(gè)數(shù)，比較時(shí)綜合兩數(shù)據(jù)有利于全面反映茶樹精油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌的控制效果?，F(xiàn)有數(shù)據(jù)表明，

42、隨著時(shí)間推移，空白組出現(xiàn)的病斑直徑是最大的，出現(xiàn)完全的個(gè)體腐爛100%個(gè)數(shù)也是最早最多的。不同精油濃度處理組之間，對(duì)病斑直徑大小和腐爛率達(dá)100%的個(gè)體個(gè)數(shù)的抑制效果由低到高排列分別5ml/L處理組<15ml/L處理組<30ml/L處理組。這說(shuō)明茶樹精油的浸泡處理可以有效抑制人工接種病原菌病害的發(fā)生及蔓延，而且茶樹精油的濃度越高，茶樹精油對(duì)病害菌的抑制效果越好，茶樹精油對(duì)人工接種青霉菌的砂糖橘的抑菌效果是隨茶樹精油濃度的增加

43、而增加的。</p><p>　　圖5 茶樹精油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌病斑直徑的控制效果</p><p>　　圖6 第6天時(shí)各處理組100%腐爛的果實(shí)個(gè)數(shù)</p><p>　　3.2茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)品質(zhì)的影響</p><p>　　3.2.1茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)硬度的影響</p><p>　　由圖1可

44、見，各組砂糖橘在貯藏期間的硬度隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)出一定的波動(dòng)，但總體經(jīng)15ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)硬度水平保持得最高，5ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)和30ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)硬度都低于空白對(duì)照組。這說(shuō)明，采用適量的茶樹精油濃度（15ml/L）的茶樹精油處理砂糖橘能夠有效保持砂糖橘的硬度，而過(guò)高（30ml/L）或過(guò)低（5ml/L）的茶樹精油濃度處理砂糖橘會(huì)降低砂糖橘的硬度。</p><p&

45、gt;　　圖1 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)硬度的影響</p><p>　　3.2.2茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可溶性固形物（SSC）的影響 </p><p>　　圖2 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可溶性固形物（SSC）的影響</p><p>　　由圖2可見，各組砂糖橘的可溶性固形物（SSC）含量在貯藏期間總體呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，但在中前期茶樹精油浸泡處理組的可溶性

46、固形物（SSC）含量略高于空白對(duì)照組的含量，而到貯藏期后期則無(wú)明顯效果，這說(shuō)明茶樹精油浸泡處理能夠保持砂糖橘的可溶性固形物（SSC）含量，但茶樹精油的作用時(shí)間和效果都比較有限。并且不同濃度茶樹精油處理的效果也比較接近。</p><p>　　3.2.3茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可滴定酸的影響 </p><p>　　由圖3可見，在整個(gè)貯藏期間內(nèi)，4組砂糖橘果實(shí)的可滴定酸濃度在前期都呈普遍下降

47、的趨勢(shì)，后期又稍有回升?？瞻捉M的可滴定酸含量在貯藏期的前6天都處于比精油浸泡處理組更低的水平，經(jīng)茶樹精油浸泡處理的各組果實(shí)酸含量比較接近，第6天之后，15ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)的可滴定酸含量明顯高于其他兩組可滴定酸含量。這說(shuō)明精油的浸泡處理對(duì)保持砂糖橘果實(shí)的可滴定酸含量具有一定的作用，尤其以15ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)效果最明顯。</p><p>　　圖3 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)可滴定

48、酸的影響</p><p>　　3.2.4 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)失重率的影響</p><p>　　由圖4可見各4組砂糖橘在貯藏期內(nèi)隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng)失重率呈上升趨勢(shì)，其中空白組整個(gè)貯藏期明顯高于茶樹精油浸泡處理組的失重率，可見茶樹精油浸泡處理可以有效的降低砂糖橘的失重現(xiàn)象，而對(duì)比3組不同濃度茶樹精油的失重率曲線，也可以很明顯的看出5ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)失重率高于15ml/

49、L濃度茶樹精油和30ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)失重率，30ml/L濃度茶樹精油浸泡處理的果實(shí)失重率在前期低于15ml/L濃度茶樹精油處理組，后期又高于15ml/L濃度茶樹精油處理的果實(shí)失重率。所以茶樹精油浸泡處理砂糖橘果實(shí)可以有效抑制砂糖橘的失重現(xiàn)象，低濃度的茶樹精油浸泡處理對(duì)維持水果的重量效果不如高濃度的處理組，但期間并不是呈現(xiàn)完全的線性關(guān)系。</p><p>　　圖4 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)失重

50、率的影響</p><p><b>　　3.3離體抑菌試驗(yàn)</b></p><p>　　由表1可看出，隨著精油濃度的增加，菌落直徑逐漸減小，抑菌率逐漸增大，當(dāng)濃度增大到10-3 mL/L時(shí)，菌餅抑菌率達(dá)到50%，為精油的抑制中濃度( EC50 )；當(dāng)濃度增大到2.4 ×10-3 mL/L時(shí)，菌餅無(wú)生長(zhǎng)，抑菌率達(dá)到100%，這說(shuō)明茶樹精油對(duì)青霉的最小抑菌濃度（M

51、IC）為2.4 ×10-3 mL/L。</p><p>　　表1 體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表</p><p><b>　　3.4討論</b></p><p>　　3.4.1 茶樹精油浸泡處理對(duì)人工接種病原菌的控制效果</p><p>　　茶樹精油對(duì)砂糖橘人工接種病原菌的抑制效果能初步解釋茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)起到

52、保鮮作用的機(jī)理。試驗(yàn)結(jié)果表明茶樹精油的浸泡處理可以有效抑制人工接種病原菌病害的發(fā)生及蔓延，而且茶樹精油的濃度越高，茶樹精油對(duì)病害菌的抑制效果越好?，F(xiàn)有的關(guān)于天然植物精油的抗菌活性的研究很多，但其抑菌機(jī)理研究尚少，且尚沒有定論，普遍認(rèn)為疏水性的精油通過(guò)直接破壞微生物細(xì)胞膜或影響能量代謝途徑來(lái)達(dá)到抗菌效果[21]。</p><p>　　3.4.2 茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘果實(shí)品質(zhì)的影響</p><

53、p>　　由得到的試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，適宜茶樹精油濃度（15ml/L）浸泡處理砂糖橘能夠有效保持砂糖橘的硬度，而過(guò)高或過(guò)低茶樹精油濃度處理砂糖橘會(huì)降低砂糖橘的硬度。而不同濃度茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘可溶性固形物（SSC）含量的影響卻比較接近，且茶樹精油的有效作用時(shí)間和效果也比較有限。茶樹精油對(duì)砂糖橘可滴定酸的作用效果主要集中在貯藏期的中前段，在貯藏期后期各組砂糖橘的酸含量都呈回升狀態(tài),而這和砂糖橘本身的生理生化變化有關(guān)。茶樹精油浸泡處理對(duì)

54、砂糖橘失重的抑制是最明顯的，并且最具規(guī)律性，越高濃度茶樹精油越容易起效。</p><p>　　茶樹精油對(duì)保持砂糖橘品質(zhì)的作用主要來(lái)源于茶樹精油的抗生物活性，它能抑制多酚氧化酶的活性、能抑制呼吸作用、能維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性、能保持酶的活性等[14]。這使其能有效阻止砂糖橘貯藏期品質(zhì)的劣變，保持砂糖橘的營(yíng)養(yǎng)成分和新鮮度， 抑制砂糖橘貯藏期間的各種生理生化變化[14]。采后砂糖橘硬度下降速率與其貯藏壽命密切相關(guān),茶樹精油

55、處理能有效地降低果蔬貯藏期硬度下降的速率[14]。在砂糖橘貯藏過(guò)程中，內(nèi)含物含量變化較顯著的是可溶性固形物含量。果實(shí)采后依靠自身積累的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)維持自身的生命活動(dòng)，因而在貯藏期間可溶性固形物含量會(huì)下降[22]。貯藏前期， 柑桔果實(shí)中大分子碳水化合物在相關(guān)酶的作用下降解為可溶性的糖類，隨著果實(shí)衰老的進(jìn)行， 呼吸作用開始以小分子糖類作為代謝底物， 這個(gè)過(guò)程導(dǎo)致果實(shí)的可滴定酸含量在整個(gè)貯藏期并不一定表現(xiàn)出單一的上升或下降趨勢(shì)[21]，也是試驗(yàn)中

56、可滴定酸含量在貯藏期后期回升的原因。果蔬保鮮，首先就是保水,貯藏期間果蔬失重主要是由于失水造成的。茶樹精油處理會(huì)在一定程度上降低了果蔬貯藏期間的失重率,成膜效果越好的保鮮劑,保水效果越明顯[14]。</p><p>　　3.4.3離體抑菌試驗(yàn)</p><p>　　離體抑菌試驗(yàn)測(cè)得了茶樹精油對(duì)青霉菌的最低抑菌濃度（MIC）和抑制中濃度( EC50 )的數(shù)值，為其抗菌性提供了最基本的藥學(xué)數(shù)據(jù)。

57、茶樹精油的最小抑菌濃度(MIC)或最小殺菌濃度一般在1%以下，對(duì)真菌的抑制濃度更小，因此茶樹精油擁有良好的廣譜抗菌活性[23]。</p><p><b>　　4結(jié)論</b></p><p>　　1茶樹精油浸泡處理對(duì)維持砂糖橘品質(zhì)，減緩貯藏期的砂糖橘失重率，硬度，可滴定酸的下降具有一定作用，但對(duì)可溶性固形物的保持作用較有限。</p><p>　　

58、2茶樹精油浸泡處理對(duì)砂糖橘人工接種病害具有明顯抑制效果，可以減緩病斑的擴(kuò)大及腐爛的嚴(yán)重程度。</p><p>　　3茶樹精油對(duì)指狀青霉的體外抑制效果顯著，對(duì)青霉的抑制中濃度( EC50 )為1 mL/L，最小抑菌濃度（MIC）為2.4 mL/L。</p><p>　　4茶樹精油浸泡處理砂糖橘是一種極為方便和易于大面積推廣的果實(shí)保鮮方法，本課題研究結(jié)果表明，茶樹精油在砂糖橘的商業(yè)貯藏和銷售過(guò)

59、程中是一種值得探究使用的技術(shù)手段，茶樹精油作為一種天然無(wú)公害的新型保鮮劑的出現(xiàn)具有很高的開發(fā)前景。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　［1］ 鄧伯勛．園藝產(chǎn)品貯藏運(yùn)銷學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002.118 一120。 </p><p>　?。?］ 陳杰忠．果樹栽培學(xué)各論南方本（第３版 ）[M]．北京：中

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