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文檔簡介
1、黃曲霉毒素B1酶聯(lián)免疫競爭檢測法,酶聯(lián)免疫競爭法工作原理,,,樣 品,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,樣品,,黃曲霉毒素B1分子,微孔板,,微 孔 表 面 情 況,,,,,AFB1抗體,標準品,,,標準溶液,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
2、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,酶標抗原,,,,,,,,,,,,酶標抗原,酶,AFB1,標準品, 樣品 和 酶標抗原加進微孔,,,,樣品,酶標抗原,樣 品 孔,先加,后加,,,,標準品,酶標抗原,標
3、 準 孔,先加,后加,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,孵育30分鐘,抗 原 與 抗 體 結(jié) 合,微 孔 清 洗,洗滌5次,間隔2分鐘,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,加入酶催化反應底物,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
4、,,,,,,加入反應底物A和B,,,孵 育 15 分 鐘,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,顯 色,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,反 應 孔,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,陰 性 對 照 孔,
5、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,陰性對照孔=沒有黃曲霉毒素B1分子與酶標抗原競爭所有抗體都與酶標抗原結(jié)合,陽 性 對 照 孔,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1 ng/ml 標準孔 = 黃曲霉毒素B1分子結(jié)合到抗體上剩余的抗體再與酶標抗原結(jié)合,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,陽 性 樣 品
6、,,,,,,,,,,,酶標抗原結(jié)合得越少,顏色越淺,,,加入終止液,反應液由藍色變成黃色,上酶標儀讀取數(shù)據(jù),畫標準曲線,,,,,,,,調(diào)零孔,陰性孔,0.1 ng/ml,0.5 ng/ml,1 ng/ml,5 ng/ml,10 ng/ml,酶聯(lián)免疫競爭法標準曲線,,,,,,0.1,1,10,ng/ml,,,,,,,O.D.,,,不同溫度條件下的標準曲線,,,,,,0.1,1,10,ng/ml,,,,,,,O.D.,,,,,
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