1、腎素檢測(cè)的最新發(fā)展情況,,幾個(gè)問題,為什么傳統(tǒng)上腎素檢測(cè)活性？為什么現(xiàn)在腎素要變?yōu)闇y(cè)濃度？,腎素前體由406個(gè)氨基酸組成，其中包含兩個(gè)前片段，分別為20和46個(gè)氨基酸。成熟的腎素包含340個(gè)氨基酸，分子量為37KD。,腎素,腎素原，腎素與活性腎素的異同腎素活性與活性腎素的區(qū)別活性腎素在體內(nèi)的意義,腎素檢測(cè)的幾個(gè)基本概念,,,,,,無活性的腎素原,有活性的腎素原,腎素,,腎素原,,活性腎素,傳統(tǒng)腎素檢測(cè)試劑——腎素活性檢測(cè),試

2、劑盒組分：抗Ang I多抗包被管125I標(biāo)記的Ang I 校準(zhǔn)品（6個(gè)）質(zhì)控品酶抑制劑洗液,檢測(cè)步驟,Ang I 轉(zhuǎn)化將預(yù)冷的200ul酶抑制劑加入200ul血漿樣本中，混合均勻后，分為兩份，分別置于冰水浴和37度中孵育1小時(shí)，孵育后將37度的樣本置于冰水浴中迅速冷卻備用。,,,腎素檢測(cè)-PRA vs PRC,腎素檢測(cè)-PRA vs PRC,血管緊張素原,腎素,血管緊張素I,,,,降解片段,,血管緊張素II,血管緊張素原酶

3、,,微生物污染,,血管緊張素轉(zhuǎn)化酶,,目前PRA檢測(cè)存在的問題各實(shí)驗(yàn)室之間差異較大，無法標(biāo)準(zhǔn)化操作復(fù)雜，重復(fù)性差，結(jié)果無互通性除此之外無國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品可參照體外的孵育條件和體內(nèi)狀態(tài)差異較大加入酶抑制劑放置血管緊張素I降解,腎素檢測(cè)-PRA vs PRC,PRA帶給臨床最大的困擾,重復(fù)性差周期長(zhǎng)依賴外送,如何做到活性腎素的檢測(cè)？關(guān)鍵在于那一個(gè)關(guān)鍵的抗體。,,,關(guān)鍵抗體,,一般的腎素抗體,,腎素檢測(cè)-PRA vs PRC,

4、腎素檢測(cè)-PRA vs PRC,Perschel et al. Clin Chem. 2004,美國(guó)內(nèi)分泌學(xué)會(huì)原醛癥指南,該指南同時(shí)推薦了腎素活性和濃度應(yīng)用于ARR實(shí)驗(yàn)，同時(shí)給出了基于美國(guó)人群的不同方法學(xué)ARR的cut-off值,美國(guó)Quest實(shí)驗(yàn)室集團(tuán)腎素濃度檢測(cè)（Renin, Direct），使用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)濃度，當(dāng)天反饋結(jié)果，85%。腎素活性檢測(cè)放棄了RIA法，改用LC-MS法，一周后出結(jié)果，15%。,美國(guó)目前腎素檢測(cè)的

5、應(yīng)用,安圖PRC和Aldosterone診斷效力研究,中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院--曹教授,放免RIA 與化學(xué)發(fā)光CLIA測(cè)醛固酮濃度呈正相關(guān)（r=0.967）,放免RIA 腎素活性與化學(xué)發(fā)光CLIA腎素濃度呈正相關(guān)（r=0.905）,放免RIA法醛固酮腎素活性比值 ARR以30為切點(diǎn)，靈敏度為90.2% ，特異度為92.6% ；化學(xué)發(fā)光CLIA法 醛固酮腎素濃度比值A(chǔ)ARR以25為切點(diǎn)，靈敏度為95.1%，特異度為83.3%；兩種方法檢