1、中山大學博士后研究工作報告X1 0 ；j 5 9 7 0F K B P l 2 ．6 過表達對心力衰竭心室肌細胞收縮功能及離子通道電流的影響T h e E f f e c t so f F K B P l 2 ．6 O V e r e x p r e s s i o n o n C o n t r a c t i l i t ya n dI o n i c C h a n n e l C u r r e n t o f V e n t

2、r i c u l a r M y o c y t e si nR a t s w i t hH e a r t F a i l u r e博士后：李德流動站名：臨床醫(yī)學博士后流動站二級學科：內科學( 心血管病)合作導師：伍衛(wèi)教授2 0 0 7 年1 月中山大學博士后研究- [ 作報告F K B P l 2 ．6 過表達對心力衰竭心室肌細胞收縮功能及離子通道電流的影響摘要研究背景：近年來研究發(fā)現，心力衰竭時心室肌細胞肌漿網( s a r

3、 e o p l a s m i er e t i c u l u m ，S R ) 鈣( C a ”) 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞，引起S R 明顯的舒張期C a 2 +滲漏。舒張期C a 2 + 滲漏主要導致兩個嚴重的后果：一是S RC a 2 + 負荷減少，以致于收縮期S R C a _ ”釋放減少，導致收縮功能障礙；二是舒張期C a 2 + 異常釋放，激活l N 虻。，導致心肌細胞復極異常，從而產生后除極并誘發(fā)室性心律失常，甚至發(fā)

4、生猝死。心力衰竭時心室肌細胞S RC a 2 + 釋放通道的穩(wěn)定性受到破壞的原因主要是F K 5 0 6 結合蛋白1 2 ．6 ( F K 5 0 6 b i n d i n g p r o t e i n l 2 ．6 ，F K B P l 2 ．6 ) 與蘭尼受體( r y a n o d i n e r e c e p t o r2 ，I 時R 2 )結合力降低。心力衰竭時交感神經張力長期增高，通過c A M P 依賴蛋白激酶A

5、途徑使R y R 2 高度磷酸化，可導致F K B P l 2 ．6 與R y R 2 結合力降低。R e i k e n 等發(fā)現B 受體阻滯劑治療可逆轉狗心力衰竭心室肌細胞R y R 2 的結構和功能障礙，增強F K B P l 2 ．6 與R y R 2結合力，進一步闡明了B 受體阻滯劑治療心力衰竭的分子機制。P r e s t l e 和L o u g h r e y等發(fā)現，上調兔和大鼠心肌細胞中F K B P l 2 ．6 的表

6、達可防止舒張期c a 2 + 滲漏，改善興奮．收縮偶聯，促進心肌細胞收縮。上述研究表明，F K B P l 2 ．6 結合力降低導致的S R C a 2 +釋放通道門控功能障礙是心力衰竭時心肌收縮力降低及室性心律失常發(fā)生的共同機制，以F K B P l 2 ．6 為目標的干預可能是心力衰竭和室性心律失常治療的一條新途徑。研究目的：本研究以心力衰竭和室性心律失常的共同機制一心室肌細胞C a 2 + 循環(huán)異常為切入點，以S RC a 2 +

7、 釋放通道穩(wěn)定蛋白F K B P l 2 ．6 為干預目標，通過腺病毒介導F K B P l 2 ．6 過表達，探討F K B P l 2 ．6 過表達對心力衰竭心室肌細胞收縮功能及離子通道電流的影響，為心力衰竭和室性心律失常的防治探索新的途徑。研究方法：①重組腺病毒載體A d ．F K B P l 2 ．6 ．G F P 的構建：將平端化的F K B P l 2 ．6片段連接到穿梭質粒p A d T r a c k ．C M V 構建

8、重組穿梭質粒p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 ；采用電穿孔法將線性化p A d T r a c k ／F K B P l 2 ．6 轉化A d E a s i e r - 1 細菌，產生重組腺病毒質粒p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 ；采用脂質體介導法用線性化p A d E a s y ／F K B P l 2 ．6 轉染H E K 2 9 3細胞，從病變的H E K 2 9 3