1、I分類號： 密級： U D C ： 學號：416522612032南 昌 大 學 碩 士 研 究 生 南 昌 大 學 碩 士 研 究 生學 位 論 文 學 位 論 文PIK3CA 基因沉默對阿司匹林抗骨髓瘤作用的 影響及機制研究基因沉默對阿司匹林抗骨髓瘤作用的 影響及機制研究The effect of PIK3CA gene silence on antimyeloma action of aspirinand the underlyi

2、ng molecular mechanisms張慧霞培養(yǎng)單位（院、系） ：南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱：陳國安 教授 主任醫(yī)師申請學位的學科門類：醫(yī)學學科專業(yè)名稱：內科學（血液病學）論文答辯日期： 2015 年 6 月答辯委員會主席： 戴育成評閱人： 李慧慧鄔國和2015 年 6 月摘要II摘 要 摘 要目的： 目的：1.通過檢測阿司匹林（ASA）對人骨髓瘤細胞株 RPMI-8226 細胞的 PIK3CA基因及蛋白表達的影響，

3、探討 PIK3CA 基因作為 ASA 抗骨髓瘤作用靶點的可行性。2.通過沉默 PIK3CA 基因后檢測 ASA 對 RPMI-8226 細胞增殖活性的影響，及其下游效應蛋白 pAKT 的變化，探討 PIK3CA 基因在 ASA 抗骨髓瘤效應中的作用及分子機制。方法： 方法：1.采用 CCK-8 方法， 檢測不同濃度 ASA （0、 2.5、 5、 10mmol/L） 處理 RPMI-8226細胞 24h、48h、72h 后細胞增殖變化。

4、2.采用實時熒光定量 PCR和 Western blot 法檢測不同濃度ASA對RPMI-8226細胞 PIK3CA 基因及蛋白表達水平。3.利用 siRNA 干擾技術，將 PIK3CAsiRNA 轉染 RPMI-8226 細胞，熒光顯微鏡下觀測細胞轉染效果， 實時熒光定量 PCR 檢測 PIK3CA mRNA 表達以檢測基因沉默效果。4.采用 CCK-8 方法，檢測沉默 PIK3CA 基因后，ASA 處理后 RPMI-8226細胞增殖

5、抑制變化。5. 采用流式細胞儀，檢測沉默 PIK3CA 基因后，ASA 處理后 RPMI-8226細胞凋亡與周期變化。6. 采用 Western blot 法， 檢測沉默 PIK3CA 基因后， ASA 處理后 RPMI-8226細胞 AKT 與 pAKT 蛋白表達的變化。結果： 結果：1. 在 2.5～10mmol/L 范圍內，ASA 以劑量依賴性抑制骨髓瘤細胞株RPMI-8226 細胞增殖。在 24～72h 內，ASA 對 RPMI