1、西南大學(xué)二零零六屆碩士學(xué)位論文y9 0 2 3 7 0堿性脂肪酶高產(chǎn)菌S e ，陽t 插s p ．S L - 1 1 的篩選及酶的分離純化與部分性質(zhì)研究學(xué)科專業(yè)：研究方向：指導(dǎo)教師：研究生：生物化學(xué)與分子生物學(xué)酶與酶工程唐云明( 教授)李長春中國·重慶2 0 0 6 年5 月A b s t r a c tS c r e e n i n g ，p u r ．f ．c a t i O na n d c h a r a c t e

2、r ．z a t i o n0 ft h eI j p a s ep r o d u c e db yS e ，’r a f f a { ；p ．S L 一1 1D i s c i p I i n e ：B i O c h e m i s t r ya n d M O I e c u I a r B i O I O g yD i r e c t i o n ： E n z y m O I o g y a n d E n z y m e

3、E n g i n e e r i n gS u p e r v i s o r ： P r o f ．。r a n gY u n m i n gM a s t e r C a n d i d a t e ： L i C h a n g - C h u nA b s t r a c tA s t r a i n O fJ j p a s ep r o d u c j n gb a c f e r j u m w a s i s o l

4、a l e d f o r ms O j I O nb e _ b e i ．I ti si d e—n l i n e da sS e r r a t i ab y1 6 s r D N A s e q u e n c e a n a I y s e a n dn a m e d a s S e 門舊婦s p ．S L 一11 ．F a c t o r s a 仟e c t i n gl h e S e ，陽盯as p ．S L 一1

5、1 I i p a s ep r o d u c t i o nw e r e i n V e s t i g a t e di ns h—a k ef l a s kl e v e l ．0 b t a i n e dr e s u I ts h O w e d t h a t t h e O p I i m u m m e d i u mc o m p o s ?0 n a n dc u I t u r a lc o n d i t

6、 i o nw e r e ( ％) ：s o y b e a n p o w d e r 4 ．0 ，s u c r o s e 0 ．5 ，o l j V eo j l1 ．O ，K 2 H P 0 4 0 ．2 ，N a H 2 P 0 4 ，M g S 0 4 ·7 H 2 00 ．1 ，1 。、，I ，e e n 8 00 ．5a n d n j t i a l i z ep H w a s 8 ．O ，3 0 ℃，

7、2 0 0 r ，m i ns h a k i n g ，f O r2 2 h ．U n d e r s u c hc o n d i t i O n st h e I i p a s ea c t i V i t yl nc u I t u r es u p e r n a t a n t w a s2 —3t i m e sh i g ha s t h e 0 r l g i n a I o n e ．T h eI i p a s

8、ew a s p u r i f i e d t oc o n s i s t e do fs e q u e n t i a l u l t r a 氍{ t r a t i o n ．i o n —e ×c h a n g ec h r o m a t O g r a p h y 0 n D E A E —S e p h a r o s e a n d s u p e r d e x 2 0 0 g e l - c h r

9、 o m a t O g r a p h y ．0 b l a i n e dt w o l i p a s es a m p l e ，n a m e da sS L P 一1a n dS L P 一2 ．a(chǎn) n d 1 t ss p e c i f l ca c t i V l t yw a s6 6 0 9 ．1 5 U ，m ga n d5 7 7 0 ．5 0 U ／m g ；p u r i f i e d4 0 ．6 7 一

10、f o l da n d3 5 ．0 8 一f o l d ．Y l e l dw a s 2 0 ．9 ％a n d 3 ．3 ％．s o m e c h a r a c l e r O f t h e e n z V m e a r e a l s O i n i d e n t 訊e d ， T h e0 p t i m u mt e m p e 陽t u r e O fJ j p a s eS L p 一1 i s5 0 ℃a

11、n d t h eO p t j m u m p Hj s9 ．0 ．T h em O J e c u I a rw e j g h lo ft h ep 洲f i e dI i p a s eS L p 一1 l sa b o u t3 1 9 K D ，i n f e r i o rm o l e c u I a r i s a b o u t 7 49 K D ：T h eo p I i m u m t e m p e r a t

12、 u r eo f I I p a s e S L p 一2 i s 4 7 ℃ a n d t h e o p l i m u m p H i s 9 ．0 ，T h em O I e c u l a rw e i g h t0 ft h ep u r i f i e d l i p a s eS L p 一1 i s a b o u t3 7 7 K D ， i n f e r I O r m o l e c u l a ri sa