1、有害赤潮正成為越來(lái)越嚴(yán)重的全球性海洋災(zāi)害。本文針對(duì)目前赤潮藻分類(lèi)鑒定和快速檢測(cè)方法中的不足,從最基本的檢測(cè)方法與技術(shù)的建立和優(yōu)化入手,對(duì)赤潮生物分類(lèi)、鑒定中的形態(tài)學(xué)、化學(xué)分類(lèi)學(xué)和分子分類(lèi)學(xué)問(wèn)題以及赤潮生物原位增長(zhǎng)率測(cè)定等基礎(chǔ)性科學(xué)問(wèn)題開(kāi)展了研究,同時(shí)也在寡核苷酸、肽核酸和細(xì)胞凝集素3類(lèi)探針的設(shè)計(jì)、篩選、驗(yàn)證、開(kāi)發(fā)等方面開(kāi)展了系列研究,建立和發(fā)展了上述3類(lèi)探針的檢測(cè)應(yīng)用技術(shù),并對(duì)這些探針進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證和在現(xiàn)場(chǎng)樣品的檢測(cè)中進(jìn)行了應(yīng)用。本文

2、的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果包括以下幾個(gè)方面：1.建立了赤潮監(jiān)測(cè)中樣品采集處理、分離和純化培養(yǎng)的技術(shù)體系；建立和優(yōu)化了裸甲藻(Gymnodinium)掃描電鏡觀察技術(shù)和環(huán)境樣品的掃描電鏡觀察方法；提出了庫(kù)爾特計(jì)數(shù)是相對(duì)簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、可行的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法；應(yīng)用基于反相高效液相色譜(HPLC)的光合色素分析技術(shù)及原位熒光激發(fā)光譜測(cè)定方法,得出不同類(lèi)群浮游植物對(duì)不同的營(yíng)養(yǎng)鹽限制存在不同響應(yīng)機(jī)制的結(jié)論；用熒光強(qiáng)度來(lái)監(jiān)測(cè)浮游植物生理狀態(tài)及營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)變化具

3、有一定的可行性,HPLC和原位熒光兩種方法指示浮游植物的生理狀態(tài)存在一定差異。2.基于光合色素分析的化學(xué)分類(lèi)方法能從光合色素組成和比例上區(qū)分一些赤潮藻的不同屬、屬下不同種甚至同種的不同地理株系,并可為進(jìn)一步鑒定和細(xì)分這些赤潮生物提供重要的分類(lèi)依據(jù)；用光合色素組成及其比值構(gòu)建的聚類(lèi)分析能較好地反映赤潮生物間的親緣關(guān)系。用PCR產(chǎn)物分析的分子分類(lèi)方法表明,基于18S rRNA序列檢測(cè)分析的變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)分類(lèi)精確度不高；rD

4、NA序列分析相對(duì)可靠,尤其是針對(duì)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)的長(zhǎng)度和序列分析以及基于28S rRNA的D1、D2區(qū)序列分析,可以提供相對(duì)準(zhǔn)確的分類(lèi)信息,為設(shè)計(jì)分子探針提供了依據(jù)；AP-PCR是以基因組的差異分析為基礎(chǔ),所以其分類(lèi)信息較為豐富和全面?；贗TS序列建立的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)能顯示Takayama pulchellum和相關(guān)屬的親緣關(guān)系；用核糖體大亞基序列建立的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)可把Karlodinium屬和Takayama屬區(qū)分開(kāi),但不能很好地把環(huán)