1、學校代碼：1 0 2 7 0中圖分類號：0 5學號：1 1 2 2 0 0 9 6 2文獻標識碼：A上驂腳范大墨碩士學位論文論文題目靶向鉀通道K v 2 ．1 和糖皮質(zhì)激素受體的新型抗2 型糖尿病活性化合物發(fā)現(xiàn)及機制研究學 院生命與環(huán)境科學學院專 業(yè)生物化學與分子生物學研究方向藥理學研究生姓名全玲玲指導老師萬平教授沈旭研究員( 中國科學院上海藥物研究所)陳靜副研究員( 中國科學院上海藥物研究所)完成日期2 0 1 4 年3 月上海師范大

2、學碩士學位論文 摘要摘要2 型糖尿病是一種世界范圍的疾病，嚴重威脅著人類健康。2 型糖尿病的主要發(fā)病機制是胰島素抵抗和胰島p 細胞功能紊亂。本論文將針對這兩方面開展相應的活性化合物的發(fā)現(xiàn)及機制研究工作，為抗2 型糖尿病新型藥物的研發(fā)提供新的策略和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。首先，胰島p 細胞功能紊亂是導致2 型糖尿病的關(guān)鍵因素之一。胰島p 細胞中存在多種不同的離子流，其中電壓門控性鉀離子通道( K v ) ，特別是K v 2 ．1 通道，所控制的鉀電流在

3、細胞膜復極化中起著重要作用，是糖依賴胰島素分泌的負調(diào)控因子。除此之外，近些年還發(fā)現(xiàn)K v 2 ．1 的抑制劑具有胰島p 細胞凋亡保護的作用。因此，K v 2 ．1 可以作為抗2 型糖尿病藥物研發(fā)的潛在靶點，基于此尋找既能夠促進胰島素分泌又保護胰島p 細胞凋亡，進而改善胰島p 細胞功能的K v 2 ．1的抑制劑是這種疾病藥物研發(fā)的一個新方向。在本論文的第一部分中，我們利用電勢能檢測技術(shù)，構(gòu)建了K v 2 ．1 抑制劑的篩選平臺，并從中篩選

4、發(fā)現(xiàn)了兩個K v 2 ．1的小分子抑制劑S P 6 6 1 6 和S P 3 8 2 7 。進一步的藥效學評價研究發(fā)現(xiàn)這兩個化合物均具有促進胰島素分泌和保護S T Z 誘導的胰島p 細胞凋亡的雙重作用。在機制研究中，我們系統(tǒng)的探討了K v 2 ．1 和促胰島素分泌及胰島細胞保護之間的信號通路。與文獻報道的一致，化合物S P 6 6 1 6 和S P 3 8 2 7 作為K v 2 ．1 的抑制劑，其促胰島素分泌作用與細胞內(nèi)C a 2 +

5、 活性有關(guān)。目前為止，還沒有關(guān)于K v 2 ．1 如何參與調(diào)控胰島D 細胞的凋亡的相關(guān)報道。我們利用S P 6 6 1 6 為小分子探針，首次發(fā)現(xiàn)P K C ／E r k l ／2 與P 1 3 K ／A k t 通路參與調(diào)控了K v 2 ．1 保護胰島1 3 細胞凋亡的機制。最后在基于2 型糖尿病模型d b ／d b 小鼠和H F D ／S T Z 聯(lián)合誘導的C 5 7 小鼠的動物水平藥效學評價中，我們發(fā)現(xiàn)這2 個K v 2 ．1 的

6、抑制劑S P 6 6 1 6 和S P 3 8 2 7 能夠顯著性降低模型鼠的空腹血糖，改善其口服糖耐量水平，增加血清胰島素水平，降低糖化血紅蛋白水平。S P 6 6 1 6 和S P 3 8 2 7 的發(fā)現(xiàn)強調(diào)了K v 2 ．1 抑制劑在治療2 型糖尿病中的作用，為治療2 型糖尿病提供了良好的先導化合物。其次，胰島素抵抗是產(chǎn)生2 型糖尿病的另一個主要原因。近年來隨著人們生活水平的不斷提高，肥胖患者越來越多，而肥胖產(chǎn)生的炎癥因子是導致胰