1、硫化氫因?yàn)樵谏顒?dòng)中扮演著重要的作用而得到研究工作者的廣泛關(guān)注。然而近年來(lái)越來(lái)越多的研究證據(jù)表明，認(rèn)為由硫化氫參與的一些生物活動(dòng)實(shí)際上是由多硫化氫來(lái)調(diào)節(jié)和控制的，而且H2Sn可以完成一些H2S不能參與的生理功能。H2Sn作為H2S的氧化還原產(chǎn)物，可以通過(guò)H2S與活性氧反應(yīng)產(chǎn)生。在生物體內(nèi)，H2Sn和H2S可能同時(shí)存在且可以相互轉(zhuǎn)化。很不幸的是，目前報(bào)道檢測(cè)多硫化氫的文獻(xiàn)較少。因此，了解多硫化氫在生命體中的形成過(guò)程，反應(yīng)的機(jī)理以及生理功

2、能，設(shè)計(jì)可以選擇性的檢測(cè)H2Sn的熒光探針具有非常重要的意義。
　　苯硫酚在有機(jī)合成、制藥和工業(yè)生產(chǎn)得到廣泛的應(yīng)用。苯硫酚同時(shí)也是一種具有高毒性的環(huán)境污染物，在自然環(huán)境中和生物體內(nèi)累積會(huì)嚴(yán)重危害生態(tài)環(huán)境和人體健康。因此構(gòu)建高靈敏度的、高選擇性的檢測(cè)苯硫酚的熒光探針在化學(xué)、生物和環(huán)境等領(lǐng)域具有非常重要的意義?；谝陨蠈?shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，本論文設(shè)計(jì)了一種新型的反應(yīng)機(jī)理檢測(cè)H2Sn和苯硫酚的熒光探針。本文總共包括四章，主要內(nèi)容如下:
　　第

3、一章緒論。主要介紹熒光探針?lè)肿拥幕窘Y(jié)構(gòu)及常見(jiàn)的識(shí)別機(jī)理，熒光分析方法檢測(cè)多硫化物和苯硫酚的研究進(jìn)展，基于此提出本論文的研究思路。
　　第二章以氮丙啶環(huán)為識(shí)別基團(tuán)的檢測(cè)H2Sn的比率型熒光探針1的構(gòu)建及應(yīng)用研究。本章中我們合成了一個(gè)以氮丙啶環(huán)為識(shí)別基團(tuán)的檢測(cè)H2S2的新型比率型熒光探針1。探針1本身以強(qiáng)熒光的醌式結(jié)構(gòu)存在，其最大發(fā)射波長(zhǎng)位于598 nm。H2S2可進(jìn)攻探針1的氮丙啶環(huán)使其發(fā)生親核開(kāi)環(huán)反應(yīng)，形成相應(yīng)的酰胺化合物，其次

4、酰胺化合物上的氮原子再親核進(jìn)攻氧雜葸環(huán)9-位碳原子，然后分子內(nèi)自發(fā)的反應(yīng)形成相應(yīng)的螺內(nèi)酰胺化合物。分子內(nèi)的螺環(huán)化作用使得氧雜葸環(huán)上3-位由醌式轉(zhuǎn)化為酚式，此時(shí)，在光的激發(fā)條件下，使得苯并噻唑環(huán)上的酚羥基質(zhì)子和氮原子之間可發(fā)生ESIPT過(guò)程，因此反應(yīng)體系整體表現(xiàn)出2-(2'-羥基苯基)苯并噻唑的熒光，其最大發(fā)射波長(zhǎng)位于450 nm，據(jù)此構(gòu)建了比率型熒光探針1來(lái)檢測(cè)H2Sn，反應(yīng)體系在450 nm和598 nm的熒光信號(hào)比值(I450/59

5、8)隨著Na2S2濃度的升高而升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該探針?lè)肿?對(duì)Na2S2具有較好的選擇性，其他一些活性硫，活性氧以及活性氮等物質(zhì)都不干擾測(cè)定。我們利用該探針實(shí)現(xiàn)了SMMC-7721人肝癌細(xì)胞中H2Sn的比率型熒光成像分析。
　　第三章以氮丙啶環(huán)為識(shí)別基團(tuán)的苯硫酚熒光探針2的合成及性質(zhì)研究。本章以氮丙啶環(huán)為識(shí)別基團(tuán)，丹磺?；鳛闊晒鈭F(tuán)合成了探針2。探針2本身因?yàn)榕まD(zhuǎn)分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移(TICT)效應(yīng)的存在而無(wú)熒光，當(dāng)向探針2的溶液中加入

6、苯硫酚后，苯硫酚會(huì)親核進(jìn)攻氮丙啶并使其開(kāi)環(huán)，形成相應(yīng)的酰胺化合物。由于上述反應(yīng)過(guò)程中生成的酰胺化合物在水溶液中溶解度較差，因此產(chǎn)物在水溶液可發(fā)生聚集，導(dǎo)致TICT過(guò)程受到抑制，因而導(dǎo)致反應(yīng)體系的的熒光信號(hào)顯著升高。反應(yīng)體系在505 nm處的熒光信號(hào)與PhSH的濃度在4-15 μM的范圍內(nèi)成線性關(guān)系，檢出限為0.05 μM。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明探針2對(duì)檢測(cè)苯硫酚具有較好的選擇性，初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明探針2可應(yīng)用于SMMC-7721人肝癌細(xì)胞中苯硫酚的