蘋-乳發(fā)酵乳酸菌的選育及其特性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蘋-乳發(fā)酵(Malolactic fermentation,MLF)乳酸菌在葡萄酒釀造中發(fā)揮著重要作用,直接影響葡萄酒的品質(zhì)。其中,發(fā)酵菌種和所處環(huán)境是決定葡萄酒蘋果酸-乳酸發(fā)酵能否順利啟動的重要因素。因此,選育具有優(yōu)良蘋-乳發(fā)酵特性的乳酸菌對葡萄酒的釀造具有十分重要的意義。
  本研究從自制葡萄發(fā)酵汁和西北某葡萄酒廠發(fā)酵葡萄汁中共分離得到菌株182株,通過初步的形態(tài)學(xué)鑒定,得到11株乳酸菌;通過生理生化、16S rRNA分子生物

2、學(xué)鑒定,得到2株瑞士乳桿菌(Lactobacillus helvelticus),其編號分別為MGX69和SC37;對其分別進行了乙醇、SO2和pH耐受性試驗及正交試驗,其中,菌株MGX69的乙醇和SO2耐受性與菌株SC37相同,其 pH耐受性較菌株SC37好,可作為后續(xù)研究的菌株;對菌株的β-D-葡萄糖苷酶和H+-ATPase活性進行了測定,結(jié)果表明,其β-D-葡萄糖苷酶均為胞外酶,且菌株MGX69的2種酶活性均較菌株 SC37高,可

3、做為后續(xù)SO2脅迫抑菌機理研究和原生質(zhì)體誘變育種的出發(fā)菌株。
  通過對菌株MGX69進行SO2脅迫處理,測定了菌株在200mg/L、250mg/L和300mg/L SO2濃度下的生長曲線;測定了菌株的谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidsade,GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量、電導(dǎo)率和胞內(nèi)核酸泄漏量

4、,其中,處理組GSH-Px和SOD活性均顯著降低,菌液電導(dǎo)率和細胞內(nèi)核酸物質(zhì)的泄漏量均有不同程度升高,表明SO2進入細胞產(chǎn)生毒害作用的原因是抗氧化酶活性降低,細胞產(chǎn)生的自由基增多,脂質(zhì)過氧化程度加重,結(jié)構(gòu)受到損傷,細胞膜產(chǎn)生膜孔。
  以選擇的菌株MGX69為出發(fā)菌株,通過紫外線照射處理的物理誘變和硫酸二乙酯處理的化學(xué)誘變對原生質(zhì)體進行復(fù)合誘變,獲得了一株性能相對良好的菌株M6911,其乙醇耐受值為12%(v/v),SO2耐受值為

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