糖基化改性對(duì)花生蛋白膜性能的影響及其作用機(jī)理研究.pdf_第1頁(yè)
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1、花生蛋白膜是一種綠色環(huán)保的新型材料,但是由于花生蛋白質(zhì)基質(zhì)間缺乏柔韌性,同時(shí)又含有大量親水基團(tuán),導(dǎo)致蛋白膜具有脆而不耐水的缺點(diǎn),限制了其在食品包裝中的應(yīng)用。針對(duì)以上問(wèn)題,本研究對(duì)花生蛋白進(jìn)行糖基化改性,并分析了改性對(duì)花生蛋白結(jié)構(gòu)的影響,再以改性蛋白為原料制備具有良好性能的花生蛋白膜,同時(shí)分析糖基化改性過(guò)程中蛋白膜性能的變化規(guī)律,通過(guò)蛋白結(jié)構(gòu)與蛋白膜性能之間的相關(guān)關(guān)系,明確糖基化改善花生蛋白膜性能的機(jī)理,最后將蛋白膜應(yīng)用在方便面調(diào)料包裝中

2、,探討其在食品包裝應(yīng)用中的可行性。
  確定了花生蛋白糖基化改性的最佳工藝條件。對(duì)比了木糖、甘露糖、乳糖、半乳糖、葡萄糖和蔗糖對(duì)花生蛋白膜各種性能的影響,木糖在提高蛋白膜機(jī)械性能的同時(shí)能改善花生蛋白膜的耐水性,因此篩選出木糖對(duì)花生蛋白進(jìn)行糖基化改性。結(jié)合單因素和正交試驗(yàn)對(duì)改性條件進(jìn)行優(yōu)化,得到花生蛋白-木糖糖基化的最適改性條件為:木糖濃度10%、pH9.5、溫度91.5℃、時(shí)間95min。此條件下,利用改性蛋白制備的蛋白膜,其拉伸

3、強(qiáng)度(TS)、斷裂延伸率(E)和溶解性(TSM)分別為10.37 MPa、96.47%和35.94%,同時(shí)呈現(xiàn)致密、緊湊的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),顯著優(yōu)于未改性花生蛋白膜。
  研究了花生蛋白結(jié)構(gòu)在不同木糖濃度、pH、溫度和時(shí)間的糖基化改性過(guò)程中的變化。SDS-PAGE結(jié)果表明,糖基化改性后,花生蛋白的條帶組成并無(wú)變化,但在糖基化改性的作用下,花生蛋白內(nèi)部發(fā)生交聯(lián),使花生球蛋白及伴花生球蛋白Ⅱ的條帶變淺,同時(shí)生成分子量較大的(>130kDa)聚

4、合物。接枝度方面,隨著木糖濃度、pH、溫度和時(shí)間的增加,花生蛋白接枝度呈上升趨勢(shì),在木糖濃度10%、pH9、90℃反應(yīng)90 min的條件下,接枝度為10.49%。紅外光譜方面,改性蛋白光譜在1117 cm-1形成新的吸收峰,而糖基化使酰胺Ⅰ和酰胺Ⅱ的吸收峰強(qiáng)度有所減弱。巰基含量方面,改性前花生蛋白中巰基含量為7.63μmol/g pro,隨著蛋白和木糖之間交聯(lián)程度的增加,蛋白結(jié)構(gòu)得以伸展,內(nèi)部巰基暴露使其含量增加,改性后巰基含量最高達(dá)9

5、.72μmol/gpro。暴露在外的巰基在蛋白成膜過(guò)程中形成二硫鍵,從而使蛋白膜中巰基含量下降,最低降至1.65μmol/g pro。表面疏水指數(shù)方面,糖基化改性使蛋白表面疏水指數(shù)顯著增加,增加木糖濃度、pH和溫度,分別使表面疏水指數(shù)增加2.2-2.8倍、1.5-3.4倍和1.6-4.2倍?;瘜W(xué)作用力方面,改性前花生蛋白中的化學(xué)作用力以氫鍵為主,糖基化使蛋白中離子鍵的作用消失,部分氫鍵被破壞,同時(shí)由于內(nèi)部疏水基團(tuán)暴露,使疏水相互作用得到

6、加強(qiáng)。
  確定了利用木糖糖基化改性蛋白(PPI-X)制備蛋白膜的工藝。在上述最優(yōu)改性條件下對(duì)花生蛋白進(jìn)行改性,并通過(guò)噴霧干燥獲得粉末狀改性蛋白,通過(guò)分析改性蛋白的溶解溫度及甘油添加量對(duì)蛋白膜性能的影響,最終確定蛋白膜制備工藝為PPI-X粉末溶解溫度20℃、甘油添加量為25%,此條件下蛋白膜TS、E和TSM分別為10.37MPa、90.11%和35.94%。
  研究了糖基化改性過(guò)程對(duì)花生蛋白膜性能的影響。溶解性方面,木糖濃

7、度的增加使蛋白膜溶解性顯著下降,木糖濃度達(dá)到10%時(shí)TSM比木糖含量為1%時(shí)下降17.4%; pH9、溫度90℃時(shí),蛋白膜溶解性最低,僅為33.64%。膨脹性方面,不同改性條件對(duì)花生蛋白膜膨脹性均有影響,其中提高pH使膜的膨脹率顯著增加,pH為11時(shí)蛋白膜膨脹率高達(dá)829.70,分別是pH3、7和9時(shí)的7.7倍、3.5倍和2.0倍。表面疏水性方面,木糖濃度增加使花生蛋白膜的接觸角(CA)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì);改性pH和溫度增加,蛋白膜

8、表面疏水性逐漸增加,pH為11時(shí)或溫度為90℃時(shí),CA相對(duì)最高,分別為64.2°和68.91°;隨著改性時(shí)間延長(zhǎng),蛋白膜表面疏水性整體呈上升趨勢(shì)。微觀結(jié)構(gòu)形態(tài)方面,木糖濃度從1%增加至10%,蛋白膜從致密片狀結(jié)構(gòu)向網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變;增加pH有利于網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成,pH為9時(shí),蛋白膜網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn),但pH高達(dá)11時(shí)分子間產(chǎn)生的過(guò)度交聯(lián),使蛋白網(wǎng)絡(luò)變得緊密;溫度低于50℃時(shí),蛋白變性程度低,蛋白膜呈現(xiàn)致密的片層結(jié)構(gòu),隨著改性溫度上升,蛋白分子結(jié)

9、構(gòu)伸展使蛋白膜呈現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。其他性能方面,糖基化改性使蛋白膜顏色加深,同時(shí)能提高蛋白膜水蒸氣阻隔性能,但對(duì)膜的氧氣透過(guò)性和熱穩(wěn)定性影響不顯著。
  初步探討了糖基化改性改善花生蛋白膜性能的作用機(jī)理。對(duì)改性過(guò)程中花生蛋白結(jié)構(gòu)變化與性能改變進(jìn)行相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)接枝度、蛋白巰基含量、表面疏水指數(shù)與蛋白膜的強(qiáng)度和延伸性均呈極顯著的正相關(guān),與TSM則呈極顯著的負(fù)相關(guān)。上述結(jié)果表明,蛋白與木糖的接枝,使蛋白結(jié)構(gòu)得以伸展,大量的疏水基團(tuán)以及巰基

10、暴露,在蛋白成膜過(guò)程中分別形成疏水相互作用和二硫鍵,使蛋白膜能承受更大程度的形變,故而強(qiáng)度和延伸性均有所增強(qiáng)。此外,疏水基團(tuán)的暴露,使蛋白親水性下降,疏水性增加,因此耐水性得到提高。
  研究了花生蛋白膜在方便面調(diào)料包裝中應(yīng)用的可行性。將花生蛋白膜包裝植物油,植物油保質(zhì)期可達(dá)180天以上,而無(wú)包裝對(duì)照組和塑料包裝的植物油保質(zhì)期較短,均為40天左右。將花生蛋白膜包裝調(diào)料粉,在貯藏60天后水分含量和菌落總數(shù)均符合標(biāo)準(zhǔn)要求。
  

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