基于DNA折紙界面上IgG抗體結構生物學的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文利用 DNA折紙作為反應平臺,解決抗體在液相中界面吸附困難的問題,利用 AFM高分辨的單分子檢測手段探究抗體 IgG的結構生物學。DNA折紙是由一條單鏈 M13mp18 viral DNA鏈為主鏈,200多條―訂書釘‖鏈分別與其配對形成的DNA納米結構。根據(jù) DNA序列及位置,我們可以進行納米搜索與定位,將地高辛修飾在選定訂書釘鏈的位置,通過抗原抗體特異性分子識別反應,獲得由 DNA折紙和抗原-抗體組成的一種“超級納米結構”。在含有

2、一定濃度的Mg2+緩沖液體系中,攜帶較多負電荷的DNA納米結構,通過正負電荷的作用,與云母襯底表面產(chǎn)生較強的吸附效果。由于抗體與 DNA折紙是連接在一起的,借助 DNA折紙良好的的界面吸附能力,抗體也固定于云母表面,為獲取抗體的高分辨圖像和研究抗原-抗體分子識別提供了可能。
  本文工作主要包含以下兩個方面:
  1)為了研究近生理環(huán)境下抗體的精細結構,克服了抗體構象因界面吸附取向帶來的成像難題。利用 DNA折紙精確的納米定

3、位方法,將抗體 IgG“捆綁”在DNA折紙上:在折紙的邊緣設計位點并修飾多個地高辛分子,每兩個鄰近分子為一組,讓抗體與之充分反應。在室溫、液體環(huán)境下獲得具有典型 Y形特征的單個抗體分子的高分辨圖像,并得到抗體亞分子結構的高度,長度等信息。
  2)為了研究抗原-抗體相互作用機理,抗體臂展與抗原排布之間的規(guī)律,在DNA折紙外緣設計位點修飾多個地高辛分子,相鄰兩個分子為一組,讓抗體與之充分反應,研究抗體分子單價結合和雙價結合時的形態(tài)表

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