1、本研究對濟南諾能生物工程有限公司生產(chǎn)的中性蛋白酶的發(fā)酵液提取分離工藝進行了探討，通過本研究可工業(yè)化生產(chǎn)食品級固體中性蛋白酶。首先對中性蛋白酶酸堿穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性進行了檢測。中性蛋白酶發(fā)酵液用乙酸-乙酸鈉調(diào)整pH4.80-5.20范圍內(nèi)較穩(wěn)定，加入0.2％的山梨酸鉀，可在一定時間內(nèi)抑制雜菌的生長，加入0.1%無水氯化鈣，可以增強中性蛋白酶活力和穩(wěn)定性。以公司現(xiàn)有發(fā)酵能力，發(fā)酵液的處理選用隔膜壓濾機板框過濾，過濾面積為150㎡，過濾壓力為0

2、.6MPa，選擇添加3%玉米淀粉作為助濾劑，0.3%聚丙烯酰胺作為絮凝劑，濾餅頂水量為發(fā)酵液體積的10%。中性蛋白酶板框過濾液超濾機選用管式超濾機，整個過程確保溫度低于25℃，選用截留分子量為10000Da的聚丙烯腈膜，壓力控制為0.4MPa左右，超濾結(jié)束后，液體中性蛋白酶活為初始酶活力的6.7倍左右，收率高于95%。鹽析過程中，硫酸銨添加量為中性蛋白酶濃縮液質(zhì)量的25%左右，濾餅酶活力約為760000u/g，鹽析收率高于95%；選用加