1、本論文共分為三章,包括緒論、DNA修飾電極的制備及電化學(xué)行為研究、高靈敏度適配體傳感器的制備和應(yīng)用。
　　 緒論部分對(duì)化學(xué)修飾電極的發(fā)展、基本知識(shí)、現(xiàn)狀以及在分析化學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)的綜述；介紹了DNA修飾電極、適配體修飾電極的發(fā)展,基本知識(shí)；論述了電化學(xué)發(fā)光基礎(chǔ)理論知識(shí)和典型電化學(xué)發(fā)光體系的發(fā)光原理。
　　 第二章是DNA修飾電極的制備及電化學(xué)行為研究。制備了一種簡(jiǎn)單有效的親水性電極-DNA復(fù)合膜電極。巰基化的DNA

2、通過(guò)形成Au-S的過(guò)程中被固定在金電極的表面,研究了Ru(bpy)32+-三丙胺(TPA)發(fā)光體系在DNA修飾電極電化學(xué)、電化學(xué)發(fā)光行為。結(jié)果表明:質(zhì)子化的TPA與DNA鏈上的磷酸鹽基團(tuán)通過(guò)靜電作用實(shí)現(xiàn)對(duì)TPA的富集作用；而且DNA電極上面的磷酸鹽基團(tuán)利于TPA的去質(zhì)子化,提高TPA的氧化和電化學(xué)發(fā)光效率從而降低了TPA的檢測(cè)限。此DNA修飾電極對(duì)TPA的檢測(cè)限達(dá)到了0.7 nM,而裸電極對(duì)TPA的檢測(cè)限是3.2 nM。由于DNA修飾電

3、極對(duì)TPA氧化的改善,在pH7.5的條件下,觀察到TPA-Ru(bpy)32+體系在0.9 v左右處的低電位電化學(xué)發(fā)光。低電位發(fā)光可用于降低對(duì)有機(jī)分子的氧化損傷,提高修飾電極的重復(fù)使用次數(shù),低電位發(fā)光的出現(xiàn)可進(jìn)一步拓展DNA修飾電極的應(yīng)用范圍。
　　 第三章是制備了具有attomole質(zhì)量檢測(cè)限的適配體傳感器并將其應(yīng)用在凝血酶的測(cè)定領(lǐng)域。通過(guò)自組裝方法將巰基化凝血酶適配體修飾到金電極表面,然后與其互補(bǔ)鏈形成雙鏈DNA(ds-DN

4、A),利用釕配合物嵌入ds-DNA的特性引入探針?lè)肿訕?gòu)筑適配體傳感器。目標(biāo)物凝血酶與其適配體結(jié)合導(dǎo)致雙鏈的破壞及釕探針的釋放,從而產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光信號(hào)的降低。與傳統(tǒng)方法比,本方法不僅省略了繁瑣的標(biāo)記步驟,而且一個(gè)ds-DNA分子可以插入多個(gè)鄰菲咯啉釕[Ru(phen)32+]分子,因此極大提高了檢測(cè)靈敏度,對(duì)凝血酶的檢測(cè),達(dá)到了attomole的質(zhì)量檢測(cè)限和0.02皮摩爾(pM)的濃度檢測(cè)限,優(yōu)于其它方法。同時(shí)利用溶菌酶適配體及對(duì)溶菌酶的