1、MicroRNA是非編碼RNA的重要家族成員之一，廣泛存在于動植物中，大小約為22個堿基，是一類在進化上高度保守的內(nèi)源性的小分子RNA。本課題所研究的miR-370位于位于小鼠12號染色體(12qF1)，對應(yīng)人14號染色體(14q32)。miR-370的成熟體包含20個核苷酸，位于Dlk1-Dio3印記基因簇的Gtl2下游。miR-370在胚胎中特異性表達，對miR-370的異常表達進行深入研究，對小鼠胚胎發(fā)育、個體生長、疾病發(fā)生調(diào)控生

2、命活動具有重要意義。
　　為了闡明miR-370對小鼠發(fā)育的影響，本課題通過建立過表達miR-370轉(zhuǎn)基因小鼠模型，以野生型FVB鼠和轉(zhuǎn)基因鼠的胚胎和成年小鼠為研究對象，利用實時定量PCR、蘇木精-伊紅染色和亞硫酸鹽測序等方法，檢測野生鼠和轉(zhuǎn)基因鼠胚胎和成鼠中miR-370的表達情況、組織形態(tài)變化和DNA甲基化水平，并觀察雄性小鼠的精子活力和雌性小鼠的動情周期，以此分析miR-370過表達對小鼠各個組織尤其是生殖腺的影響和對小鼠胚

3、胎發(fā)育及性成熟后發(fā)育的影響。
　　形態(tài)學(xué)觀察顯示miR-370轉(zhuǎn)基因小鼠每胎產(chǎn)子數(shù)降低，異常死亡情況增多，雌雄比例異常。雄鼠在胚期18.5天和出生后體重均有所增加。實時定量RT-PCR結(jié)果表明相對野生型小鼠，miR-370在轉(zhuǎn)基因鼠各組織中表達水平均有所上升。HE染色結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因鼠胚期肺臟出現(xiàn)大量瘀血。腎臟皮質(zhì)發(fā)育尚可，髓質(zhì)部分發(fā)育不完全，皮髓交界處不清晰。胎盤三層界限不清晰，成膠質(zhì)細胞層和蛻膜層明顯減少，血竇擴張，存在淤血。成

4、體轉(zhuǎn)基因鼠肺臟間質(zhì)大量出血，肺泡斷裂融合，瘀血嚴重，局部出現(xiàn)實變。腎臟大量瘀血，血管擴張，腎小球內(nèi)出血。精巢中曲細精管的間隙增大，出現(xiàn)曲細精管萎縮和生精細胞減少現(xiàn)象，并伴隨精子活力降低，畸形率升高，質(zhì)膜完整率下降的情況。卵巢顆粒細胞層減少，卵泡內(nèi)卵母細胞放射冠消失，顆粒細胞排列疏松，間隙增寬，核固縮以及卵泡囊性擴張，同時動情周期出現(xiàn)紊亂。
　　綜合以上結(jié)果可知，miR-370過表達對小鼠胚胎、胎盤和成體各組織的發(fā)育均產(chǎn)生影響，為進