花粉管通道法將外源DNA導(dǎo)入玉米引起變異的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文利用花粉管通道法將外源DNA(大豆)導(dǎo)入玉米自交系,后代產(chǎn)生了多種多樣的變異類(lèi)型,變異性狀十分豐富,這些變異性狀有的具有供體性狀,有的產(chǎn)生新的性狀,通過(guò)對(duì)其后代農(nóng)藝性狀觀察、葉綠素含量測(cè)定、過(guò)氧化物同工酶酶譜、營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)測(cè)定等分析。具體結(jié)果如下: 1)提取供體(高蛋白大豆富錦J05-2-075)的總DNA,配成500μg/mI濃度,分別在受體(普通玉米自交系7313)自交授粉后22h、24h、26h導(dǎo)入,從變異的效果來(lái)看:26

2、h>24h>22h(D<,1>代、D<,2>代表現(xiàn)相同),其中D<,1>代26h處理的變異率最高,1.34%;D<,2>代26h處理的變異率為1.09%。 2)調(diào)查田間農(nóng)藝性狀(如株高、穗位高、葉片數(shù)、葉片的長(zhǎng)度與寬度、光合葉面積、雄穗分枝數(shù)、百粒重、生育期、結(jié)苞數(shù)、果穗長(zhǎng)度和籽粒形狀等),對(duì)不同于CK的植株的農(nóng)藝性狀進(jìn)行觀察、記錄、統(tǒng)計(jì)與分析,結(jié)果表明這些變異有的表現(xiàn)為供體性狀(如生育期延長(zhǎng)、百粒重減輕、黃色籽粒形狀橢圓似大豆

3、等,例見(jiàn)圖3-5中的26-D<,1>-6和圖3-9中的26-D<,2>-5),有的表現(xiàn)為新的性狀(如植株高度和葉片長(zhǎng)寬度有變化、植株有分蘗、雄穗分枝數(shù)和雌穗數(shù)增加、籽粒形狀不規(guī)則,粒小,有稃,百粒重明顯減少等,例見(jiàn)圖3-5中的26-D<,1>-11、26-D<,1>-13和圖3-9中的26-D<,2>-3、26-D<,2>-19、26-D<,2>-21等)。 3)對(duì)獲得的變異株進(jìn)行過(guò)氧化物酶同工酶酶譜分析,結(jié)果表明:變異株中同工

4、酶酶譜變異大,變異后代與受體間有明顯的差異(如變異株26h-D<,2>-19在遷移率Rf<,13>=0.87、Rf<,14>=0.89,出現(xiàn)了兩條供體特有而受體沒(méi)有的酶譜帶,酶帶顏色深,活性強(qiáng);26h-D<,2>-3在迂移率Rf<,10>-0.57、Rf<,12>=0.69、Rf<,14>=0.82出現(xiàn)了供體和受體都沒(méi)有的酶譜帶。 4)對(duì)D<,2>代變異株系籽粒的油分、蛋白質(zhì)含量、醇溶蛋白含量和谷蛋白含量進(jìn)行測(cè)定分析,按照選育高

5、蛋白玉米的方向要求:油分、蛋白質(zhì)含量和谷蛋白含量有所提高,而醇溶蛋白含量降低,從中選出符合育種目標(biāo)的9個(gè)株系,分別為26h-D<,2>-1、26h-D<,2>-3、26h-D<,2>-6、26h-D<,2>-7、26h-D<,2>-13、26h-D<,2>-14、26h-D<,2>-15、26h-D<,2>-18和26h-D<,2>-19,這些株系與CK相比,葉綠素含量增加,增加幅度在7.12%~28.2%;油分含量增加7.65%~44

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