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1、山東師范大學碩士學位論文細胞外鈣調(diào)素對雪松花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響姓名:王宏申請學位級別:碩士專業(yè):植物學指導教師:趙遵田;林金星20040428山東師范大學碩士論文中文摘要本文采用光學顯微鏡,激光掃描共聚焦顯微鏡,S D S —P A G E 及顯微紅外光譜分析技術(shù),利用不能透過細胞膜的鈣調(diào)素的單克隆抗體和大分子拮抗劑w 7 一a g a r o s e ,對裸子植物雪松( C e d r u s d e o d a r a ) 花
2、粉離體培養(yǎng)時,萌發(fā)率、生長速率、胞內(nèi)鈣離子分布、蛋白質(zhì)表達及細胞壁成分的變化進行了觀察,表明胞外鈣調(diào)素在雪松花粉萌發(fā)和花粉管生長過程中發(fā)揮重要的作用。在培養(yǎng)基中分別加入鈣調(diào)素的單克隆抗體和w 7 一a g a r o s e 后,與生長在正常培養(yǎng)基中的雪松花粉相比,花粉的萌發(fā)率和生長速率明顯降低,萌發(fā)所需要的時間加長,并伴有花粉管的形態(tài)異常現(xiàn)象。鈣調(diào)素的拮抗劑處理后,通過顯微紅外光譜( F T I R ) 分析,發(fā)現(xiàn)細胞壁酯類物質(zhì)的含量
3、增加,而酸性果膠質(zhì)和蛋白質(zhì)的含量下降。使用S D S - P A G E 技術(shù),發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)中添加鈣調(diào)素的單克隆抗體后,花粉管總蛋白的含量下降,這與F T I R 檢測到的蛋白質(zhì)含量下降的結(jié)果一致,并且發(fā)現(xiàn)幾條特定蛋白的含量隨著鈣調(diào)索單克隆抗體濃度的增大而逐漸減少。另外,通過在花粉管中裝載鈣離子熒光指示劑f l u o 一3 A M ,利用激光共聚焦顯微技術(shù)研究了細胞外鈣調(diào)素對花粉管頂端游離鈣離子分布的影響。發(fā)現(xiàn)鈣調(diào)素的單克隆抗體使得花粉
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