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1、近年來(lái),微生態(tài)制劑在生產(chǎn)中已被廣泛應(yīng)用。植物乳桿菌是動(dòng)物腸道中的正常菌群,也是一種重要的乳酸菌,具有較好的腸道粘附能力,能產(chǎn)生乳酸及一些抗菌物質(zhì),調(diào)節(jié)動(dòng)物消化道微生物區(qū)系平衡,抑制腸道腐敗菌、致病菌的繁殖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收,增強(qiáng)機(jī)體免疫力。然而益生菌益生作用的發(fā)揮與其數(shù)量密切相關(guān),其數(shù)量對(duì)維持腸道健康環(huán)境和提高機(jī)體免疫功能起著關(guān)鍵作用。目前,口服途徑由于安全性高且成本低,是飼用益生菌的理想手段。然而,由于胃酸對(duì)益生菌的破壞作用,益生
2、菌的活菌數(shù)在此過(guò)程中會(huì)大幅度下降,難以有足夠數(shù)量的活菌到達(dá)腸道或定植腸道而發(fā)揮作用。微膠囊技術(shù)可顯著增強(qiáng)菌體對(duì)外界不利環(huán)境的耐受力,大大提高菌體進(jìn)入腸道內(nèi)的存活率。
近年來(lái)已有研究證實(shí)益生菌和植物多糖之間存在共生關(guān)系。一些植物多糖不僅能夠明顯促進(jìn)雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌的增殖,而且還能抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)證實(shí)泰山松花粉多糖(TPPPS)是一種有效的免疫增強(qiáng)劑和免疫佐劑,但是益生菌和TPPPS之間是否具有協(xié)同益生效應(yīng)尚不
3、清楚。TPPPS作為一種水溶性多糖,容易受到胃酸和酶的破壞,影響其穩(wěn)定性及限制加工應(yīng)用。因此,為了保護(hù)益生菌的活性以及TPPPS的結(jié)構(gòu)和功能,探索TPPPS和植物乳桿菌是否具有協(xié)同效應(yīng),本試驗(yàn)以植物乳桿菌和TPPPS為芯材,海藻酸鈉和殼聚糖為壁材,制備植物乳桿菌-TPPPS微膠囊,并通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)包埋工藝進(jìn)行優(yōu)化,旨在得到制備植物乳桿菌-TPPPS微膠囊的最佳工藝條件。本試驗(yàn)篩選出制備微膠囊的最佳條件,即水相與油相體積比為1︰3,CaC
4、O3與海藻酸鈉的質(zhì)量比為1︰4,CaCO3與冰醋酸的物質(zhì)的量比為1︰:4,殼聚糖濃度為4 g/L。在此條件下研制的植物乳桿菌-TPPPS微膠囊平均粒徑為125.4μm,呈球性好且表面光滑。微膠囊化后的植物乳桿菌通過(guò)模擬的胃腸道環(huán)境后存活率可達(dá)62.36%,說(shuō)明微膠囊能夠較好的抵制胃酸環(huán)境,降低酸性胃液對(duì)益生菌的破壞,提高益生菌在腸液中存活的數(shù)量。
選取體重相近的SPF獺兔48只,隨機(jī)分為4組。I-IV組獺兔每天分別口服飼喂1
5、mL植物乳桿菌、植物乳桿菌+0.5%TPPPS、微膠囊、PBS。在飼喂后7、14、21、28、35、42 d每組隨機(jī)選取3只兔子采血檢測(cè)血清中兔瘟抗體水平,溶菌酶水平,IFN-γ水平。在0、14、28、42 d每組隨機(jī)選取3只解剖無(wú)菌采集回腸、盲腸組織檢測(cè)腸組織中乳酸菌和大腸桿菌的定植情況;采集小腸組織分析腸絨毛發(fā)育狀況。結(jié)果顯示微膠囊可以提高獺兔的日增重,改善腸道微生物環(huán)境,促進(jìn)腸絨毛的發(fā)育,提高抗體、溶菌酶、IFN-γ的水平,并且效
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