1、目的 近年來，研究者應用組織工程學原理和方法，對周圍神經進行脫細胞處理，制備了神經細胞外基質移植物；并用此種移植物修復周圍神經缺損，獲得了促進受損神經纖維再生及其功能恢復良好的效果。然而該種移植物對發(fā)出相關神經纖維的神經母細胞(如脊神經的脊髓前角細胞和神經節(jié)細胞)有何作用，尚未見有文獻報導。該研究對此問題進行了探討。 方法 用wistar大鼠30只，10只用化學提取法制備坐骨神經脫細胞基質移植物；另20只分為實驗

2、組(坐骨神經缺損脫細胞基質移植物橋接組)和對照組(坐骨神經缺損組)，每組10只。動物飼養(yǎng)3到4個月后取移植物，脊髓腰7-骶2節(jié)段和同節(jié)段脊神經節(jié)，做HE，尼氏染色標本以及電鏡標本，進行組織學和超微結構觀察，并對脊髓前角和脊神經節(jié)細胞的數(shù)量進行統(tǒng)計學分析。 結果 用化學提取法制備脫細胞周圍神經基質移植物的各步驟如果改在室溫下進行，可縮短制備時間7-10天。實驗組(脫細胞移植物橋接神經缺損)術后跟蹤觀察大鼠的自然狀態(tài)可見，術

3、后3或4個月時，移植術側下肢行走時后蹬動作有力，足趾能分開，步態(tài)趨于正常；針刺足底有逃避動作。對照組(神經缺損)動物術側下肢的運動和感覺功能未見恢復。術后3或4個月實驗組動物移植物的HE染色橫切片和縱切片標本上，見有大量的再生·1·神經纖維；在電鏡標本上，再生軸突，髓鞘及施萬細胞也清晰可見。實驗組和對照組正常側的脊髓L7-S2節(jié)段前角細胞的HE和尼氏染色標本可見，細胞形體較大，分為內側群和外側群，胞質內有較豐富的呈斑塊狀的尼氏體。實驗組

4、移植物和對照組缺損側脊髓L7-S2節(jié)段前角細胞的形態(tài)結構基本正常，但是分群已不明顯，并有膠質細胞增生。特別是支配四肢肌的前角細胞的數(shù)量減少，尤以對照組為甚。統(tǒng)計分析結果表明，脊髓前角細胞數(shù)實驗組移植側(10.37±1.45)與正常側(14.40±1.81)以及移植側與對照組缺損側(5.97±1.69)比較，差異均顯著(P＜0.01)。 實驗組和對照組正常側L7-S2脊神經節(jié)HE和尼氏染色標本可見，細胞形態(tài)結構正常，胞質內充滿細砂

5、粒狀尼氏體，由大、中、小細胞組成。實驗組移植側和對照組缺損側的L7-S2脊神經節(jié)細胞的形態(tài)結構基本正常。 但是其數(shù)量較正常側減少，并以對照組缺損側最為明顯。統(tǒng)計分析結果表明，脊神經節(jié)細胞數(shù)實驗組移植側(45.57±5.88)與正常側(53.57±6.57)以及移植側與對照組缺損側(36.90±5.15)比較，差異均有顯著性意義(P＜0.01)。 結論 該實驗在無菌，室溫條件下制備周圍神經細胞外基質移植物能夠縮短時