1、煙草灰霉病是近年來廣西煙草病害調(diào)查中當?shù)匦掳l(fā)現(xiàn)的病害。目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上防治灰霉病主要依靠化學藥劑，而化學藥劑容易造成病菌產(chǎn)生耐藥性、環(huán)境污染等問題。隨著越來越多的拮抗微生物陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)，利用微生物防治煙草灰霉病具有廣闊的發(fā)展前景。本研究在對煙草灰霉病菌內(nèi)生拮抗細菌篩選的基礎上，構(gòu)建復合微生物并測定其對煙草灰霉病的防治效果，另對拮抗細菌的生防機制進行探討，獲得的研究結(jié)果如下：
　　 ⑴采用菌絲生長速率法從470株煙草內(nèi)生細菌中獲得對煙

2、草灰霉病菌有拮抗作用的菌株70株，對該病菌有營養(yǎng)競爭作用的菌株32株;另以孢子萌發(fā)法獲得對病菌孢子萌發(fā)抑制率較高的菌株72株;從中選擇抑菌效果較好的27株生防菌，采取煙葉組織法進行復篩，有12株菌株的防治效果超過50％。對其中7株進行生防菌之間親和性的測試，除菌株Y98外，其他菌株之間均表現(xiàn)親和。
　　 ⑵根據(jù)生防菌株之間的親和性及抑菌效果，選擇5株生防菌株，結(jié)合其形態(tài)特征、生理生化性狀、16S rDNA和gyrB基因序列分析，

3、將菌株G59、G81和Y11鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，菌株Y88和Y141屬于假單胞菌屬（Pseudomonas）產(chǎn)熒光假單胞菌類群。
　　 ⑶對以上5株生防菌進行組合，有兩株菌株組合、三株菌株組合和四株菌株組合3種不同的組合方式。在所有生防菌組合中，Y11+Y141菌株組合的防治效果最高為72.02％，Y11+Y88+Y141+G59菌株組合的防治效果最差，為42.41％。為

4、了提高Y11+Y141菌株組合的防治效果，對它們的混配比例進行優(yōu)化。試驗結(jié)果顯示，比例為2∶1的防治效果比各單菌株以及其他混配比例處理的防治效果都高，為75.68％。
　　 ⑷選擇Y11∶Y141(2∶1)的組合進行溫室盆栽試驗防治效果測定。從試驗結(jié)果看，各處理的保護效果均比治療效果高。Y11+Y141(2∶1)、Y11、Y141和300mg/L的異菌脲各處理的保護效果分別為65.81％、57.91％、42.09％和94.66％

5、;其治療效果分別為59.51％、42.19％、34.50％和85.78％，復合菌株的防治效果高于單菌株。
　　 ⑸Y11和Y141兩株生防菌的胞外代謝產(chǎn)物對供試的12種植物病原真菌均有不同程度的抑制作用，抑菌譜較廣。它們的胞外代謝產(chǎn)物對煙草灰霉病菌菌絲生長的抑制作用要強于揮發(fā)性代謝產(chǎn)物。通過光學顯微鏡觀察，Y11和Y141兩株生防菌的胞外代謝產(chǎn)物均能使灰霉病病菌菌絲形態(tài)發(fā)生顯著變化，菌絲粗短畸形，部分原生質(zhì)滲漏，細胞壁出現(xiàn)褶皺。