1、本研究采用稀釋平板法、病原菌誘捕法從溫室土壤中的10份土樣中分離到59個(gè)木霉菌株。獲得了具有明顯生防潛能的哈茨木霉T25菌株。該菌株具有拮抗譜廣、拮抗作用強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、產(chǎn)孢量大，盆栽防病效果好等特點(diǎn)。 通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察鑒定木霉菌T25為綠色木霉Trichoderma atroviride。通過(guò)rDNA-ITS1序列分析，T25的rDNA-ITS1序列片段與genebank數(shù)據(jù)庫(kù)中所有序列片段比較，發(fā)現(xiàn)T25的rDNA-ITS1序

2、列與T. atroviride的序列同源性最高(98％)，與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致。 研究發(fā)現(xiàn)T25菌株生長(zhǎng)迅速在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好。溫度對(duì)T25菌株菌絲生長(zhǎng)和孢子產(chǎn)生影響顯著，30℃時(shí)菌絲生長(zhǎng)最快，25℃時(shí)產(chǎn)孢量最大。T25在pH值2～10范圍內(nèi)均可生長(zhǎng)，pH值5～6時(shí)生長(zhǎng)最快，pH值為6時(shí)孢子產(chǎn)生量最大。光照處理對(duì)茵絲生長(zhǎng)影響顯著，并且明顯促進(jìn)孢子產(chǎn)生。淀粉、蔗糖分別為菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最佳碳源。硫酸銨和蛋白胨為菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢

3、的最佳氮源。不同維生素對(duì)菌絲生長(zhǎng)和孢子產(chǎn)生的作用不同，VB<,1>+VH、VB<,6>對(duì)菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最有利。微量元素對(duì)菌絲生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，Ca<'2+>有利于孢子的產(chǎn)生。在PDA膜上，T25菌株的孢子從8h以后開(kāi)始萌發(fā)，16h萌發(fā)率達(dá)到100％。 在T25與 Botrytis cinerea strain Bo-Ci 的對(duì)峙培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)木霉菌生長(zhǎng)快于Botrytis cinerea，兩種菌接觸后Bo-Ci生長(zhǎng)停止。隨后

4、，木霉菌繼續(xù)生長(zhǎng)，覆蓋灰霉菌的菌落并大量產(chǎn)孢。顯微觀察發(fā)現(xiàn)T25菌絲首先向Bo-Ci趨性生長(zhǎng)，然后緊貼灰霉菌菌絲平行生長(zhǎng)或穿入菌絲生長(zhǎng)，最后灰霉菌菌絲瓦解。 對(duì)T25的抗生作用試驗(yàn)表明離體條件下T25菌株的抗生作用不大。發(fā)酵原液對(duì)Bo-Ci菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)均無(wú)抑制作用，但T25的揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)病菌孢子萌發(fā)具有一定的抑制作用，盡管抑制率還不到10％。含有T25分泌物的培養(yǎng)基對(duì)病菌孢子萌發(fā)有很強(qiáng)的抑制作用，抑制率高達(dá)75.06％。