1、外界信息大多是由視覺系統(tǒng)接收、處理和感知的。而視覺信息先在視網(wǎng)膜中進(jìn)行初步處理再傳導(dǎo)給大腦。視覺信息傳遞的通路是通過視網(wǎng)膜中各種神經(jīng)元之間的突觸進(jìn)行傳遞的。視網(wǎng)膜神經(jīng)元的軸突匯聚成視神經(jīng)，它們以動(dòng)作電位的方式將視覺信息傳送至數(shù)個(gè)履行各種功能的大腦結(jié)構(gòu)區(qū)域。視覺信息最為直接的通路是由光感受器通過雙極細(xì)胞至神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的傳遞。水平細(xì)胞接收來自光感受器的輸入，并通過側(cè)向軸索影響周圍的雙極細(xì)胞和光感受器。無長突細(xì)胞接受雙極細(xì)胞的輸入，并通過側(cè)向投

2、射影響周圍的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、雙極細(xì)胞和其他的無長突細(xì)胞。眼的發(fā)生是一個(gè)多因素參與的復(fù)雜的過程，發(fā)育過程中各細(xì)胞是嚴(yán)格按照特定的時(shí)空模式表達(dá)和相互作用的。先由視杯發(fā)育為胚眼，再逐漸發(fā)育出視網(wǎng)膜各層細(xì)胞。所有類型的細(xì)胞都是由神經(jīng)干細(xì)胞分化而來的，神經(jīng)干細(xì)胞在不同發(fā)育時(shí)期具有不同的增殖特點(diǎn)和功能特性，這也是形成片層化結(jié)構(gòu)的重要因素之一。由于視網(wǎng)膜的上述特殊功能，對(duì)視網(wǎng)膜的研究一直是神經(jīng)生物學(xué)中的熱點(diǎn)。
　　 目的：通過觀察小鼠視網(wǎng)膜的形態(tài)

3、結(jié)構(gòu)來探索視網(wǎng)膜的發(fā)生及片層化過程；研究小鼠視網(wǎng)膜中雙極細(xì)胞的發(fā)育過程及其與視網(wǎng)膜片層化過程的關(guān)系；觀察小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)干細(xì)胞的增殖與分化過程。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫熒光、BrdU檢測(cè)技術(shù)和蘇木精-伊紅染色法染色法對(duì)胚胎期及出生后小鼠視網(wǎng)膜形態(tài)結(jié)構(gòu)及神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化進(jìn)行觀察，并對(duì)視網(wǎng)膜BrdU和PKC-α陽性細(xì)胞密度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
　　 結(jié)果：①小鼠在胚胎E10時(shí)出現(xiàn)視杯，視網(wǎng)膜片層化是從E13時(shí)開始，先分化出色素

4、上皮層和神經(jīng)母細(xì)胞層，胚胎時(shí)期從神經(jīng)母細(xì)胞層中分化出神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和內(nèi)網(wǎng)層。視網(wǎng)膜的片層化主要在出生后形成，出生后神經(jīng)母細(xì)胞層逐漸分化出感光細(xì)胞層、外核層、外網(wǎng)層和內(nèi)核層，至小鼠睜眼時(shí)基本分化完全，形成視網(wǎng)膜十層結(jié)構(gòu)。②BrdU可以特異性標(biāo)記處到增殖狀態(tài)的神經(jīng)干細(xì)胞，BrdU陽性細(xì)胞在胚胎期視網(wǎng)膜中密度最高隨后逐漸減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，視網(wǎng)膜干細(xì)胞在胚胎時(shí)期數(shù)量逐漸增多，到出生當(dāng)天數(shù)量達(dá)到最大值，出生后，神經(jīng)干細(xì)胞開始分化，數(shù)量逐漸減少。

5、所以，小鼠視網(wǎng)膜干細(xì)胞在胚胎期大量增殖，而出生后神經(jīng)干細(xì)胞增殖速度放慢并逐漸分化為各類細(xì)胞。③PKC-α是小鼠視網(wǎng)膜中雙極細(xì)胞的特異性標(biāo)記物，本實(shí)驗(yàn)觀察到PKC-α的陽性細(xì)胞從P5時(shí)開始出現(xiàn)，到P7時(shí)能標(biāo)記到完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，至P20時(shí)PKC-α的陽性細(xì)胞密度和細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)趨向穩(wěn)定，雙極細(xì)胞發(fā)育完全。隨著年齡的增長，到P70以后，PKC-α陽性細(xì)胞密度降低，雙極細(xì)胞逐漸退化。
　　 結(jié)論：①小鼠視網(wǎng)膜的片層化是以神經(jīng)母細(xì)胞層為基礎(chǔ)

6、逐漸發(fā)育形成的，在出生前僅發(fā)育出色素上皮層、神經(jīng)母細(xì)胞層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層，小鼠在出生時(shí)視網(wǎng)膜尚未發(fā)育完全，出生后是視網(wǎng)膜細(xì)胞分化的高峰期，P0到P14期間視網(wǎng)膜形成片層化結(jié)構(gòu)，發(fā)育完全。在視網(wǎng)膜發(fā)育成熟之前，小鼠尚未睜開眼睛，視網(wǎng)膜的片層化過程與其功能的成熟相一致。②視網(wǎng)膜片層化的過程也是細(xì)胞增殖、分化的過程。分化出的細(xì)胞要遷移至成熟位置，也就形成了視網(wǎng)膜的片層化結(jié)構(gòu)。小鼠視網(wǎng)膜的神經(jīng)干細(xì)胞在胚胎時(shí)期大量增殖，為出生的細(xì)胞分化做準(zhǔn)備。在出