1、目的:世界范圍內乳腺癌發(fā)病率、死亡率高，嚴重威脅女性的健康。本研究旨在通過“一步法”制備抗HER2單克隆抗體偶聯(lián)納米白蛋白紫杉醇制劑(Abra/anti-HER2)，并通過體內、外實驗驗證其對HER2陽性乳腺癌的抗腫瘤作用，初步探討其機制。
　　方法:將納米白蛋白紫杉醇(Abraxane(@))及抗HER2單克隆抗體（anti-HER2monoclonal antibody）通過EDC/NHS法進行一步偶聯(lián)。利用透射電鏡(TEM)

2、及動態(tài)光散射(DLS)檢測偶聯(lián)納米粒的形態(tài)及粒徑分布，設立空白對照組、Taxol(@)、Abraxane(@)及Abra/anti-HER2納米藥物組，分別從體內及體外比較其對HER2陽性乳腺癌(SKBR-3)的抗腫瘤作用。CCK-8法檢測藥物的細胞毒作用，DAPI染色觀察藥物誘導的細胞核形態(tài)變化，流式細胞術(FCM)檢測藥物處理后細胞周期分布變化，蛋白印跡法(Western blot)檢測藥物處理后凋亡相關蛋白表達水平變化。構建荷瘤裸

3、鼠模型，尾靜脈注射藥物，觀察腫瘤大小變化及裸鼠生存曲線，實驗結束后切取裸鼠重要器官行H-E染色。另將藥物與近紅外染料NIR-797進行物理吸附，利用小動物活體成像儀實時觀察藥物在裸鼠體內的分布。
　　結果:本研究成功構建Abra/anti-HER2納米藥物，DLS及TEM證實其粒徑分布均勻，大小約為100nm;CCK-8結果顯示Abra/anti-HER2納米藥物處理SKBR-3細胞48h后測得IC50遠低于其它組別(0.002μ

4、g/mL VS0.04μg/mL(Taxol(@))、0.02μg/mL(Abraxane(@))，p＜0.05);DAPI結果顯示相較于其它兩組，Abra/anti-HER2納米藥物組可觀察到更多的核固縮及凋亡小體等凋亡征象;FCM檢測結果顯示Abra/anti-HER2納米藥物組的S期阻滯率較其它兩組明顯升高(66.63±2.21％VS45.61±4.47％(Taxol(@))、54.99±2.01％(Abraxane(@))，p＜

5、0.05);為進一步探討凋亡機制，使用Western blot對凋亡相關蛋白進行檢測，結果示caspase3等凋亡相關蛋白表達上調，提示藥物誘導細胞凋亡為其抗腫瘤機制;體內實驗證實Abra/anti-HER2納米藥物具有更強的腫瘤抑制率（0.336±0.027cm3VS2.210±0.138cm3（生理鹽水對照組），p＜0.05）及更好的機體耐受性，小動物活體近紅外成像可見Abra/anti-HER2納米藥物組的信號相比Abraxane