1、目的：
　　近20年來，我國甲狀腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)明顯增加趨勢，年均增長約6.2％。據(jù)《2012中國腫瘤登記年報》報道，在全國腫瘤登記地區(qū)中，甲狀腺癌的發(fā)病率占據(jù)第10位，為6.54/10萬；而在女性中占據(jù)第8位，達10.09/10萬；男女發(fā)病比為1：3.2。甲狀腺癌中90%以上的為分化型甲狀腺癌（DTC），而其中甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)是其中最為常見的病理類型[1]。目前對

2、于PTC的治療外科手術最為重要，內分泌治療和放射性I131治療也非常關鍵。其中術后內分泌治療對降低甲狀腺癌的復發(fā)和轉移也不容忽視。有研究表明TTF-1為分子量為38kd的DNA結合蛋白，屬于轉錄因子家族中的一員，在甲狀腺生長發(fā)育過程中起重要作用，因特異性蛋白的基因啟動子或增強子區(qū)域有TTF-1的結合位點，對甲狀腺特異性基因（如Tg、TPO、TSHR和NIS）的轉錄具有調控作用。Pax-8也屬于轉錄因子家族中的一員，該基因表達一種核蛋白，

3、調節(jié)甲狀腺濾泡細胞的生長、終末分化及甲狀腺特異基因的表達。細胞特異性基因的轉錄通常都依賴于一系列的細胞的特異性轉錄因子，如甲狀腺特異性轉錄因子1(Thyroid transcriptionfactor-1，TTF-1)和成框基因8編碼的轉錄因子(Paired—domaintranscription factor,Pax-8)等。TSHR是G蛋白偶聯(lián)受體超家庭中的一員，由αβ兩條多肽鏈亞基組成的大分子蛋白質，其主要存在于甲狀腺濾泡細胞膜上

4、，是TSH主要的作用部位。相關研究表明TSHR的表達隨著甲狀腺組織的分化程度的降低而降低。TSH與細胞表面的TSHR結合后，與細胞表面的G蛋白的α亞基發(fā)生偶聯(lián)，通過G蛋白介導激活 cAMP（腺苷酸環(huán)化酶），從而使胞內cAMP升高， cAMP進一步激活 PKA（蛋白激酶 A），PKA活化后激活核內的特異性轉錄因子，如TTF-1（甲狀腺特異性轉錄因子-1）、TTF-2（甲狀腺特異性轉錄因子-2）、Pax-8（成框基因8）或使其磷酸化，從而發(fā)

5、揮調節(jié)甲狀腺的功能，進一步影響甲狀腺細胞表面特異性受體的表達，如TG、TPO、TSHR、NIS等。所以研究甲狀腺轉錄因子可間接反映TSHR的數(shù)量及活性的表達。目前對于TSHR在甲狀腺癌的表達研究較多，結果不甚一致，對其轉錄因子的研究鮮有報到，而且TTF-1、Pax-8在甲狀腺良、惡性腫瘤中的表達定位及差異性仍存爭議。轉錄因子（TTF-1，Pax-8）與TSHR的關系研究國內尚未涉及。本課題通過免疫組化SP法觀察甲狀腺乳頭狀腺癌（PTC）

6、組織及結節(jié)性甲狀腺腫（NG）組織中TTF-1、Pax-8與TSHR的表達情況，并對TTF-1、Pax-8與TSHR的相關性進行研究，為甲狀腺乳頭狀腺癌發(fā)生發(fā)展、診斷及治療療效提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　本實驗收集了河北醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院東院區(qū)腺體外科自2014年08月至2016年07月外科手術切除的甲狀腺組織標本98例，包括甲狀腺乳頭狀癌56例，結節(jié)性甲狀腺腫42例。所有甲狀腺癌患者術前均未經過放，化療。分化型甲狀腺癌

7、按標準國際抗癌聯(lián)盟制定的TNM分期，分為I期38例，II期2例，III期11例，IV期5例。有淋巴結轉移的38例，無淋巴結轉移的18例。所有組織均取4μm厚度的連續(xù)切片7張，其中1張切片常規(guī)HE染色進行病理形態(tài)學觀察，其余6張分別用于TTF-1、Pax-8及TSHR的免疫組織化學染色及陰性對照。采用SP法檢測TTF-1、Pax-8及 TSHR在甲狀腺乳頭狀癌及結節(jié)性甲狀腺腫的表達情況，并結合臨床資料進行分析。應用SPSS統(tǒng)計軟件采用卡方

8、檢驗，非參數(shù)秩合檢驗和秩相關等統(tǒng)計方法對數(shù)據(jù)進行分析。檢驗標準為P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　1 TTF-1在甲狀腺組織中表達部位為細胞核。甲狀腺乳頭狀癌（PTC）、結節(jié)性甲狀腺腫（NG）組織中的TTF-1陽性表達分別80.4%和95.2%，結節(jié)性甲狀腺中的陽性率高于甲狀腺乳頭狀癌，對TTF-1進行Wilcoxon W檢驗在兩者中的陽性及強陽性表達差異無統(tǒng)計學意義（Z=-0.892， P=0.372，P>0.0

9、5）。I/II甲狀腺乳頭狀癌組比III/IV甲狀腺乳頭狀癌有更高的比例，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），說明TTF-1的減少，臨床預后越差。此外我們還研究其在其他病理學參數(shù)，如淋巴轉移、腫瘤大小、患者性別、年齡與TTF-1的關系，均無統(tǒng)計學意義。不能認為TTF-1的表達與這些因素有關。(見表1-6)
　　2 Pax-8在甲狀腺細胞的表達為細胞核和（或）細胞漿。在兩組病例中均有表達，但表達形式存在顯著差異：在PTC中主要為細胞核漿

10、共表達，且差異有統(tǒng)計學意義（Z=-5.689，P=0.000，P<0.01）；在NG中主要表達于細胞核，差異也具有統(tǒng)計學意義（Z=-6.256，P=0.000，P<0.01)。（見表7-9）
　　3 TSHR在甲狀腺腫細胞中主要表達細胞膜的基底側；此外甲狀腺乳頭狀癌細胞的胞漿也有少量表達。但甲狀腺乳頭狀癌組織的著色強度小于結節(jié)性甲狀腺組織。在56例PTC組織中陽性率為83.9%，其中陽性和強陽性率為48.2%；42例結節(jié)性甲狀腺腫

11、中陽性率為100%，陽性和強陽性率占85.7%；對兩組數(shù)據(jù)進行Wilcoxon W檢驗有統(tǒng)計學意義，可以認為結節(jié)性甲狀腺腫的TSH受體表達高于甲狀腺乳頭狀癌。TNM分期：Ⅰ/Ⅱ期陽性占比36/40，陽性表達率為90.0%；Ⅲ期/Ⅳ期陽性占比11/16，陽性表達率為68.8%。陽性表達率隨分期程度的增高，呈下降趨勢，運用Wilcoxon W檢驗，TSHR表達水平與臨床分析的差異有統(tǒng)計學意義，可以認為TSHR的表達水平越低，臨床預后越差。此

12、外，還對比了淋巴轉移，患者性別，腫瘤大小、年齡與TSHR的關系，均無統(tǒng)計學意義。不能認為TSH受體表達與這些因素有關。(見表10-15)
　　4對TTF-1與TSHR在甲狀腺乳頭狀癌中的表達進行Spearman相關性分析， TTF-1的表達量變化與TSHR的表達變化呈正相關(r=0.520， P=0.000)，即在TTF-1在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達下降的時候，TSHR的表達亦隨之下降。在結節(jié)性甲狀腺腫內二者也存在正相關性（r=

13、0.649， P=0.000）。對Pax-8與TSHR在甲狀腺乳頭狀癌中胞核胞漿共表達進行Spearman相關性分析P=0.069，按α=0.05水準，P>0.05，尚不能認為在甲狀腺乳頭狀癌中Pax-8與TSHR的表達具有相關性。
　　結論：
　　1 TTF-l在甲狀腺良惡性病變組織中均可較好的表達，臨床可檢測TTF一1來正確判斷腫瘤的來源。
　　2 Pax-8在 PTC主要共表達于細胞核和細胞漿，且具有良好的鑒別診