Sox4基因在小鼠腭突發(fā)育與腭裂形成過程中的表達(dá)及作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  探討Sox4基因在BALB/c正常小鼠與腭裂模型腭突發(fā)育過程中的表達(dá)差異,初步研究該基因在小鼠上腭發(fā)育過程中的作用及其與腭裂發(fā)生的關(guān)系。
  方法:
  腭裂發(fā)生率統(tǒng)計:將12只BALB/c孕鼠平均分為兩組,將實驗組孕鼠于GD10(gestation day10)一次性管飼50mg/kg維甲酸(retinoic acid, RA),對照組孕鼠給予管飼等量玉米油。在GD17上午8時將孕鼠處死,剖腹取得胎鼠,放

2、大鏡下觀察每組胎鼠腭裂形成情況,統(tǒng)計腭裂發(fā)生率。
  Sox4蛋白檢測:按照上述方法獲取對照組及實驗組孕鼠各15只。分別在GD13、GD14、GD15上午8時處死實驗組與對照組孕鼠各5只,剖腹剪取胎鼠頭部標(biāo)本共253例,常規(guī)石蠟包埋及切片。利用HE染色觀察胎鼠腭突發(fā)育過程中的形態(tài)變化,采用免疫組織化學(xué)方法檢測目的蛋白在各組間不同時期腭突中的表達(dá)差異。
  結(jié)果:
  1.在統(tǒng)計腭裂發(fā)生率的實驗中對照組共獲得胎鼠55只,

3、其中腭裂胎鼠為0只;實驗組共獲得胎鼠52只,腭裂胎鼠為44只。由此得出GD10給予50mg/kg維甲酸誘導(dǎo)BALB/c小鼠腭裂發(fā)生率為84.6%.可誘導(dǎo)穩(wěn)定的腭裂模型。
  2.獲得HE染色切片23例,結(jié)果顯示對照組雙側(cè)腭突在GD14發(fā)生水平向翻轉(zhuǎn)并接觸融合,實驗組腭突翻轉(zhuǎn)推遲至GD15但并未融合。
  3.免疫組化實驗共獲得切片219例,結(jié)果顯示,Sox4在實驗組與對照組腭突的被覆上皮及腭中線上皮中均有表達(dá),用平均光密度值

4、[1]分析對照組GD13-GD15組內(nèi)兩兩對比皆有差異(p<0.05),且在GD14表達(dá)量最高。實驗組中GD13、GD14與GD15之間的表達(dá)對比均無差異(p>0.05)。實驗組與對照組組間對比在GD13
  表達(dá)無差異(p>0.05),GD14對照組高于實驗組(p<0.05),GD15實驗組高于對照組(p<0.05)。
  結(jié)論:
  Sox4在腭裂與正常腭突中GD14-GD15的表達(dá)存在明顯差異,在腭突融合期發(fā)揮調(diào)

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