胃癌BGC-823細(xì)胞中HIF-1α、HIF-2α對(duì)GLUT1、PKM2的調(diào)控作用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:檢測(cè)HIF-1α、HIF-2α、GLUT1、PKM2在胃癌BGC-823細(xì)胞中的表達(dá)情況,研究siRNA技術(shù)特異性沉默人胃癌BGC-823細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α、HIF-2α)后葡萄糖載體蛋白-1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)的蛋白及mRNA表達(dá)情況,探索HIF-1α、HIF-2α對(duì)胃癌細(xì)胞內(nèi)GLUT1、PKM2的調(diào)控作用。
  方法:實(shí)驗(yàn)總共分為4組,分別是對(duì)照組、轉(zhuǎn)染Control siRNA組、

2、轉(zhuǎn)染HIF-1αsiRNA組、轉(zhuǎn)染 HIF-2α siRNA組,利用實(shí)時(shí)熒光定量 RT-PCR法及 Western-blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染HIF-1α siRNA、HIF-2α siRNA及Control siRNA后細(xì)胞內(nèi)GLUT1、PKM2蛋白及mRNA的表達(dá)情況。
  結(jié)果:利用RNA干擾技術(shù)能有效沉默BGC-823細(xì)胞中的HIF-1α、HIF-2α蛋白及mRN A的表達(dá)。轉(zhuǎn)染H IF-1αs iRN A、HIF-2αs iRN

3、 A后細(xì)胞內(nèi)G LU T1、PKM2在mRNA及蛋白表達(dá)水平均下降(P<0.05),其中siRN A抑制HIF-1α后PKM2下調(diào)較siRN A抑制HIF-2α更明顯(P<0.05),HIF-1α、HIF-2α對(duì)GLUT1的調(diào)控比較差異結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  結(jié)論:研究結(jié)果提示HIF-1α和HIF-2α均可在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平參與調(diào)控GLUT1、PKM2的表達(dá),其中HIF-1α對(duì)PKM2起到主要調(diào)控作用,HIF-1

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