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文檔簡介
1、從發(fā)病率來看,中國食管癌發(fā)病率及死亡率占全球總發(fā)病率的一半以上,因而食管癌成為我國腫瘤防治方面的重點。河北省作為食管癌高發(fā)地區(qū),涉縣、磁縣、武安等地區(qū)的食管癌尤其高發(fā),呈明顯的區(qū)域性。據(jù)相關部門的統(tǒng)計,河北省的這些地方是全國食管癌發(fā)病率4倍以上。河北省腫瘤醫(yī)院作為河北省內最大的腫瘤醫(yī)院,將食管癌的防治作為首要任務。目前,手術是治療食管癌常用方法,單純手術治療5年生存率不超過20%,并且術后一年內復發(fā)率達22%。
我們提出食管癌
2、的核心病機是“血液衰耗,胃脘干槁”,而常說的氣郁、血瘀、痰阻都是伴隨著核心病機出現(xiàn)的不同表象。提出治療大法為“甘潤濡養(yǎng)”,臨床應用加味啟膈散可以明顯抑制接受手術后食管癌患者以及晚期患者腫瘤轉移情況。本實驗探究加味啟膈散對食管癌上皮細胞間質化的作用,揭示抑制食管癌細胞的侵襲轉移的機制。
目的:探討加味啟膈散對食管癌細胞上皮細胞間質化的影響,揭示加味啟膈散通過抑制食管癌細胞的上皮細胞間質化,從而抑制食管癌細胞遷移侵襲能力,減少食管
3、癌的轉移。
方法:
1.本研究選用高分化食管鱗癌細胞TE1,分為對照組、加味啟膈散50μg/ml、加味啟膈散100μg/ml,加入加味啟膈散培養(yǎng)24小時后,分運用Western blotting檢測三組食管癌細胞株細胞snail蛋白、cytokeratins14蛋白和Vimentin蛋白的用藥前后表達。
2.應用激光共聚焦檢測對照組、加味啟膈散50μg/ml、加味啟膈散100μg/ml,加入加味啟膈散培養(yǎng)2
4、4小時后,對TE1細胞的結構的影響。
3.應用劃痕實驗檢測對照組、加味啟膈散50μg/ml、加味啟膈散100μg/ml,加入加味啟膈散培養(yǎng)24小時后,對TE1細胞遷移能力的影響。
4.應用Transwell法檢測對照組、加味啟膈散50μg/ml、加味啟膈散100μg/ml,加入加味啟膈散培養(yǎng)24小時后,對TE1細胞侵襲能力的影響。
結果:
1.Western blotting法測加味啟膈散對TE1
5、中snail蛋白、cytokeratins14蛋白和Vimentin蛋白的表達。snail蛋白結果顯示,對照組0.150±0.070,當加味啟膈散濃度為50μg/ml時為0.121±0.003,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時0.034±0.004。Vimentin蛋白結果顯示,對照組0.163±0.005,當加味啟膈散濃度為50μg/ml時為0.128±0.005,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時0.055±0.008。cyt
6、okeratins14蛋白結果顯示,對照組0.035±0.003,當加味啟膈散濃度為50μg/ml時為0.038±0.003,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時0.033±0.001。
2.激光共聚焦檢測加味啟膈散對 TE1結構骨架蛋白角蛋白cytokeratins14的影響,結果顯示對照組呈現(xiàn)紡錘形或梭形的不規(guī)則的間質細胞形態(tài);當加味啟膈散濃度為50μg/ml時,較對照組更趨向于圓形或是方形的細胞形態(tài);當加味啟膈散100μ
7、g/ml時,TE1呈現(xiàn)橢圓形或方形的規(guī)則的上皮細胞形態(tài)。
3.劃痕實驗檢測加味啟膈散對TE1遷移的影響,將TE1分為加味啟膈散50μg/ml、加味啟膈散100μg/ml組及對照組。12h后,結果顯示,對照組35.366±1.665,當加味啟膈散濃度為50μg/ml時為57.166±2.000,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時77.566±3.066。24h后,對照組26.633±2.753,當加味啟膈散濃度為50μg/ml
8、時為35.133±3.780,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時46.366±2.375。
4.Transwell法測加味啟膈散對TE1侵襲的影響。結果顯示,對照組105.626±3.785,當加味啟膈散濃度為50μg/ml時為65.523±5.131,當加味啟膈散濃度為100μg/ml時為25.366±4.131。
結論:
1.加味啟膈散可以抑制snail蛋白、Vimentin蛋白的表達(P<0.05)
9、。當加味啟膈散濃度為100μg/ml時,對snail蛋白、Vimentin蛋白的抑制優(yōu)于加味啟膈散濃度為50μg/ml。
2.對照組、加味啟膈散50μg/ml組、加味啟膈散100μg/ml組中的cytokeratins14的表達沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.加味啟膈散干預后的食管癌細胞由紡錘形或梭形的不規(guī)則的間質細胞形態(tài)轉變?yōu)橐?guī)則的橢圓形或方形的上皮細胞形態(tài)。
4.劃痕實驗證實加味啟膈散可以抑制食管
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