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![miRNA-29a通過(guò)調(diào)控PTEN-Akt通路促進(jìn)PC12細(xì)胞軸突伸長(zhǎng).pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/b8cc39c9-57b8-4d1d-8954-9ac9794f7b7c/b8cc39c9-57b8-4d1d-8954-9ac9794f7b7c1.gif)
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1、目的:1、研究 miR-29a對(duì) PC12細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響,為進(jìn)一步探究miR-29a生物學(xué)作用奠定基礎(chǔ);2、探明 miR-29a調(diào)控 PTEN表達(dá),激活 PTEN下游Akt通路。
方法:1、以PC12細(xì)胞為研究對(duì)象,建立并篩選出高表達(dá) miR-29a細(xì)胞株(PC12-pLKO-miR-29a),以高表達(dá)pLKO.1-puro-vector空載的細(xì)胞(PC12-pLKO-vector)作為對(duì)照;2、通過(guò)點(diǎn)突變及雙熒光報(bào)
2、告基因明確 miR-29a作用于 PTEN的mRNA位點(diǎn);3、通過(guò)RT-PCR、細(xì)胞免疫熒光、Western blot觀察miR-29a對(duì)PC12細(xì)胞軸突的影響。
結(jié)果:1、miR-29a能夠作用于 PTEN的3′UTRs區(qū),并特異性地降低PTEN的表達(dá)量;2、miR-29a能夠激活PTEN/Akt通路促進(jìn)PC12細(xì)胞軸突伸長(zhǎng)。
結(jié)論:本研究初步證實(shí)miR-29a能夠促進(jìn)PC12細(xì)胞分化,軸突伸長(zhǎng),該過(guò)程同miR-2
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