胰島素樣生長因子-1介導營養(yǎng)限制所致胎兒生長受限中的胎盤機制初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文從以下兩個部分闡述了胰島素樣生長因子--1介導營養(yǎng)限制所致胎兒生長受限中的胎盤機制初步研究
  第一部分 孕期營養(yǎng)限制誘導FGR大鼠模型中胎盤IGF1、IGFBP3的改變
  研究目的:
  通過孕期營養(yǎng)限制誘導FGR大鼠模型,探討營養(yǎng)限制對大鼠胎盤IGF1、IGFBP3表達的影響以及其與FGR發(fā)病之間的關(guān)系。
  研究方法:
  1.首先,通過孕期蛋白飲食限制(8%蛋白)建立營養(yǎng)限制條件,構(gòu)建FGR大

2、鼠模型,觀察營養(yǎng)限制對大鼠子代及胎盤發(fā)育的影響;
  2.HE染色病理學檢查觀察營養(yǎng)限制對胎盤發(fā)育與結(jié)構(gòu)的影響;
  3.進一步,通過熒光定量PCR檢測胎盤IGF1、IGFBP3mRNA表達水平,免疫組化方法檢測胎盤IGF1、IGFBP3蛋白表達。
  研究結(jié)果:
  1.孕期營養(yǎng)限制顯著抑制胎鼠及胎盤發(fā)育,和對照組相比,營養(yǎng)限制組子代GD19.5平均體重顯著下降,F(xiàn)GR率升高(P<0.05);
  2.胎

3、盤HE染色病理檢查發(fā)現(xiàn),營養(yǎng)限制組大鼠胎盤發(fā)育不良,迷路區(qū)變薄;
  3.熒光定量PCR結(jié)果顯示,和對照組相比,營養(yǎng)限制組胎盤IGF1、IGFBP3mRNA表達顯著下降(P<0.05);
  4.免疫組化結(jié)果顯示,大鼠胎盤部位IGF1及IGFBP3主要表達于基底層及迷路區(qū)滋養(yǎng)細胞胞漿內(nèi),和對照組相比,營養(yǎng)限制組胎盤IGF1及IGFBP3表達下調(diào)。
  研究結(jié)論:
  孕期營養(yǎng)限制抑制胎鼠及胎盤正常生長發(fā)育,導致大

4、鼠胎盤部位滋養(yǎng)細胞IGF1及IGFBP3表達下調(diào),可能影響胎盤正常結(jié)構(gòu)發(fā)育從而抑限制胎鼠生長。
  第二部分 血清限制對人滋養(yǎng)細胞株HTR-8/SVneo細胞IGF1表達及細胞侵襲力的影響
  研究目的:
  通過胎牛血清(Fetal Calf Serum,F(xiàn)BS)限制干預HTR-8/SVneo細胞模擬整體實驗,探討FBS限制對HTR-8/SVneo細胞IGF1及細胞侵襲力表達的影響。
  研究方法:
  

5、1.分別予低濃度FBS、中等濃度FBS及高濃度FBS處理HTR-8/SVneo細胞,熒光定量PCR檢測細胞IGF1、IGFBP3mRNA表達水平,細胞免疫熒光檢測HTR-8/SVneo細胞IGF1、IGFBP3蛋白表達,比較不同濃度FBS處理對HTR-8/SVneo細胞IGF1、IGFBP3的影響;
  2.同前處理,檢測不同濃度FBS處理對HTR-8/SVneo細胞MMP2mRNA及蛋白表達的影響;Transwell小室侵襲實驗

6、檢測不同濃度FBS對HTR-8/SVneo細胞侵襲力的影響;
  3.給予不同濃度rhIGF1處理HTR-8/SVneo細胞,CCK-8比色實驗法檢測rhIGF1對細胞增殖的影響;
  4.給予rhIGF1處理HTR-8/SVneo細胞48小時后,熒光定量PCR檢測細胞MMP2mRNA表達水平,細胞免疫熒光檢測細胞MMP2蛋白表達,Transwell小室侵襲實驗檢測rhIGF1對細胞侵襲力的影響。
  研究結(jié)果:

7、>  1.FBS限制導致HTR8/SVneo細胞IGF1表達下調(diào)(P<0.05);
  2.低濃度FBS導致HTR8/SVneo細胞MMP2低表達(P<0.05),細胞侵襲力下降(P<0.05);
  3.rhIGF1能顯著上調(diào)HTR-8/SVneo細胞MMP2表達水平(P<0.05),促進HTR-8/SVneo細胞增殖及侵襲(P<0.05)。
  研究結(jié)論:
  FBS限制下調(diào)人滋養(yǎng)細胞株HTR-8/SVneo

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