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文檔簡介
1、共軛亞油酸(conjugated linoleic acid,簡稱CLA)是一系列含共軛雙鍵的十八碳脂肪酸的總稱。共軛亞油酸(CLA)具有抗癌、抗動脈粥樣硬化,降血壓、抗血栓、提高免疫系統(tǒng)機能、減少脂肪沉積、抗氧化、防治糖尿病等多種獨特的生理功能。目前,CLA工業(yè)化生產(chǎn)主要是通過化學(xué)異構(gòu)法制得,其產(chǎn)物中異構(gòu)體組成復(fù)雜,不利于在食品和醫(yī)藥方面使用。亞油酸生物異構(gòu)化生成CLA,產(chǎn)物中異構(gòu)體組成單一,因此生物法與化學(xué)法相比具有選擇性合成生物活
2、性CLA的優(yōu)點。 本文根據(jù)共軛亞油酸的生物形成機理,對植物乳桿菌(Lactobacillus PlantarumAS1.555)轉(zhuǎn)化亞油酸(linoleic acid,簡稱LA)為CLA的條件進行了研究。內(nèi)容包括植物乳桿菌洗滌細胞轉(zhuǎn)化LA為CLA條件優(yōu)化,菌種誘變選育和CLA高產(chǎn)菌轉(zhuǎn)化LA為CLA條件優(yōu)化。論文主要結(jié)果如下: 1)對L.PlantarumAS1.555轉(zhuǎn)化LA生成CLA所用的培養(yǎng)基進行優(yōu)化實驗,得出其產(chǎn)C
3、LA最佳培養(yǎng)基為MRS培養(yǎng)基。在MRS配方基礎(chǔ)上,以相同碳原子重量和相同氮原子重量為條件,考察不同種類的碳源和氮源的CLA產(chǎn)量的影響,最后得出優(yōu)化的MRS培養(yǎng)基中的碳源和氮源分別為葡萄糖和牛肉膏。另外,L.PlantarumAS1.555洗滌細胞轉(zhuǎn)化LA生成CLA優(yōu)化條件為:反應(yīng)溫度30℃,反應(yīng)時間48h,磷酸緩沖液pH6.0,LA底物添加量為1.5%(V/V)時,CLA產(chǎn)量達到最大,為49.13μg/mL。LA誘導(dǎo)劑添加量小于0.1%
4、(v/v)時,LA對亞油酸異構(gòu)酶的誘導(dǎo)作用逐漸加強,添加量大于0.1%(v/v)時,LA對亞油酸異構(gòu)酶的抑制作用逐漸超過其誘導(dǎo)作用。 2)以L.PlantarumAS1.555為出發(fā)菌株,通過第一輪紫外線誘變處理后,得到2#菌株,比原菌株CLA轉(zhuǎn)化能力提高了39%,然后以2#為出發(fā)菌株進行第二輪紫外線誘變,得到菌株LU,比原始菌株CLA轉(zhuǎn)化能力提高了55%,最后以LU為出發(fā)菌株,對其進行硫酸二乙酯(DES)誘變處理,選育出突變株
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