1、大葉藻(Zostera marina L.)是多年生海草,屬被子植物門(mén),單子葉植物綱,沼生目,隸屬于眼子菜科( Potamogetonaceae)大葉藻屬(Zostera)。大葉藻是海草床的重要組成部分,但迄今為止,在大葉藻的利用方面是很不充分的,僅利用其搭建海草房,這不僅未發(fā)揮其在營(yíng)養(yǎng)學(xué)方面的價(jià)值,而且還浪費(fèi)了大量的海草資源。
　　黃酮類化合物是一類廣泛存在的天然抗氧化劑,研究表明其具有多種生理功能,如降血脂、抗氧化、抗癌等功能

2、。但是對(duì)于黃酮化合物的研究一般只限于陸生高等植物,海洋中的高等植物并未被充分開(kāi)發(fā)利用。
　　本文主要對(duì)海洋高等植物——大葉藻,研究其總黃酮的提取、純化及結(jié)構(gòu)鑒定,并研究總黃酮的抗衰老活性,主要研究結(jié)果如下:
　　首先進(jìn)行了大葉藻總黃酮的提取工藝實(shí)驗(yàn),利用單因素和正交實(shí)驗(yàn)確定了熱水提取工藝和微波輔助提取工藝的最佳條件,并對(duì)兩種工藝的最大得率與前人報(bào)道的結(jié)果進(jìn)行比較。熱水提取工藝的最佳條件:水浴溫度80℃,料液比1:60(g:m

3、L),提取次數(shù)為5,提取時(shí)間1h,大葉藻中總黃酮的得率為4.02％;微波輔助提取工藝的最佳條件:微波功率640W,提取料液比為1:40(g:mL),提取次數(shù)為5,提取時(shí)間150s,大葉藻中總黃酮的得率為3.66%。與前人報(bào)道的工藝相比較,本研究的兩種工藝優(yōu)于傳統(tǒng)工藝,與超聲輔助浸提工藝相近,但低于酶法輔助浸提工藝。
　　其次,選擇5種大孔吸附樹(shù)脂,通過(guò)靜態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn),選定兩種最優(yōu)樹(shù)脂D101-1和AB-8;再將兩種樹(shù)脂混合進(jìn)行

4、試驗(yàn),選出混合吸附樹(shù)脂最優(yōu)的混合比例,最后通過(guò)靜態(tài)實(shí)驗(yàn)與動(dòng)態(tài)實(shí)驗(yàn)確定了最佳純化工藝條件:D101-1和AB-8吸附樹(shù)脂按質(zhì)量比2:3比例混合,樣液pH為3,樣液質(zhì)量濃度為1.25mg/mL,洗脫液乙醇濃度為70%,上樣體積和上樣流速分別為6BV和3BV/h,洗脫體積和洗脫流速分別為5BV和3BV/h,而且樹(shù)脂的重復(fù)使用性能比較好。在最佳純化條件下,凍干樣品的總黃酮純度由原來(lái)12.66%±0.42%上升至51.25%±1.26%,提高了接

5、近4倍。經(jīng) LC-MS初步判斷純化后的大葉藻總黃酮主要含有木犀草素和香葉木素,并且在大葉藻中首次發(fā)現(xiàn)香葉木素。
　　最后,對(duì)大葉藻總黃酮的抗衰老活性進(jìn)行了研究,頸背部皮下注射D-半乳糖致小鼠衰老,同時(shí)灌胃不同劑量的大葉藻總黃酮,觀察大葉藻總黃酮對(duì) D-半乳糖致衰老小鼠的影響。結(jié)果表明:第一,大葉藻總黃酮能夠增加 D-半乳糖致衰老小鼠的體重,并且能夠增加衰老小鼠的腦和胸腺指數(shù);第二,大葉藻總黃酮能夠提高D-半乳糖致衰老小鼠的血清、肝

6、臟、腦組織中T-SOD的活力水平,并能夠抑制MDA含量的升高,還可以提高血清和肝臟中的T-AOC以及提高肝臟和腦組織中GSH-PX和CAT的活力水平,從而提高機(jī)體的抗氧化能力;第三,大葉藻總黃酮能夠顯著增加D-半乳糖致衰老小鼠肝、腦細(xì)胞膜的Na+-K+-ATPase和 Ca2+-Mg2+-ATPase活力水平,提高細(xì)胞膜離子的轉(zhuǎn)運(yùn)能力;第四,大葉藻總黃酮能夠顯著提高 D-半乳糖致衰老小鼠血清和腦中 ChAT的活性,抑制腦中AChE活性,