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![木蝴蝶總黃酮提取純化及藥理活性的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/10/cfc1e31e-933e-438c-990b-23b7698990ba/cfc1e31e-933e-438c-990b-23b7698990ba1.gif)
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1、目的:通過優(yōu)化木蝴蝶總黃酮的提取和純化條件,并進(jìn)行含量測(cè)定;同時(shí)檢測(cè)木蝴蝶總黃酮的體外抗氧化、抗腫瘤作用及大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)指標(biāo),為木蝴蝶總黃酮的進(jìn)一步分離、活性部位或單體化合物的制備提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:采用溶劑提取分離的方法,從木蝴蝶中提取純化總黃酮類化合物;UV法測(cè)定黃酮化合物清除羥自由基、超氧陰離子、DPPH自由基的能力;MTT法檢測(cè)OF-60對(duì)MCF-7增殖抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)OF-60對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡影響;
2、HPLC測(cè)定木蝴蝶黃酮含量及粗提取物OFC在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)。
結(jié)果:
1)木蝴蝶總黃酮的最佳提取工藝條件是:用70%(V/V)乙醇溶液、溫度70℃、木蝴蝶粗粉與固液比為(1:8)、水浴回流三次,每次2小時(shí),其提取率為19.50%。木蝴蝶總黃酮粗提物分離純化最佳實(shí)驗(yàn)條件為:用HPD100型大孔樹脂,洗脫溶液為60%(V/V)乙醇,洗脫速度為1.0BV/h,洗脫體積為5.0BV,洗脫率高達(dá)90%以上。
2)
3、木蝴蝶與不同濃度乙醇洗脫黃酮部位的體外抗氧化實(shí)驗(yàn)的結(jié)果:①對(duì)于羥自由基的清除能力從大到小依次為:OF-60> OF-80> OFC>OF-40;②對(duì)于超氧陰離子自由基與DPPH的清除能力從大到小依次為:OF-60>OFC> OF-80> OF-40;并均隨濃度的增加其抗氧能力增強(qiáng)。
3)在0-1000μg/mL范圍內(nèi),OF-60對(duì) MCF-7細(xì)胞增殖抑制作用隨濃度的增加而增強(qiáng),其中濃度為1000μg/mL的OF-60對(duì)MCF-
4、7細(xì)胞增殖抑制率達(dá)39.94%,與對(duì)照組比較呈顯著差異性(P<0.01 vs正常組)。濃度為0μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL的木蝴蝶黃酮OF-60誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞的凋亡率分別為:3.89%、11.07%、21.32%和24.19%。
4)以槲皮素為檢測(cè)指標(biāo),木蝴蝶黃酮粗提物在大鼠體內(nèi)藥物代謝過程:t1/2=2.62±0.26h,Cmax=372.93±61.72,V/F=0.41±0.26,
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