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![鐵莧菜總黃酮的提取純化及其抗氧化活性的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/da2f0ff7-fa5f-4972-af96-81f04f883cea/da2f0ff7-fa5f-4972-af96-81f04f883cea1.gif)
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文檔簡介
1、鐵莧菜(Acalypha australis L.)是一種在我國分布廣泛的大戟科一年生草本植物,是民間常用的藥材,具清熱解毒、止血、止痢等功效,其藥用價(jià)值和低廉的原料來源成本,具有一定的開發(fā)利用優(yōu)勢。隨著提取工藝和藥理活性不斷研究深入,鐵莧菜資源得到了一定的開發(fā)利用,在中藥市場占有一席之地,但是對鐵莧菜的活性成分和藥理作用的研究仍處于基礎(chǔ)階段。研究以鐵莧菜全草為研究對象,研究鐵莧菜總黃酮的堿提、醇提和微波輔助提取工藝,確定各提取工藝的最
2、佳參數(shù)。通過乙酸乙酯、正丁醇的萃取得到鐵莧菜黃酮的4個(gè)不同的組分,分別研究各個(gè)組分鐵莧菜黃酮的含量及各部位的體外抗氧化活性,得出乙酸乙酯部位的鐵莧菜黃酮有較強(qiáng)體外抗氧化活性。通過建立D-半乳糖小鼠衰老模型,進(jìn)一步研究其體內(nèi)抗氧化活性。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
1、以鐵莧菜總黃酮得率為指標(biāo),通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,得出超聲輔助堿溶酸沉法提取鐵莧菜總黃酮的最佳工藝為:料液比1∶20,堿性提取液pH11,溫度60℃,酸沉pH2
3、.5,超聲提取時(shí)間90min;有機(jī)溶劑乙醇提取鐵莧菜總黃酮的最優(yōu)工藝為:料液比1∶50,乙醇體積濃度為50%,時(shí)間2h,提取溫度70℃;微波輔助乙醇提取鐵莧菜黃酮的最優(yōu)工藝參數(shù)為:料液比1∶40,乙醇體積濃度為50%,微波萃取3min,提取功率為280W。
2、經(jīng)過有機(jī)溶劑的液-液萃取,得到不同極性部位的黃酮,并考查聚酰胺樹脂對乙酸乙酯相鐵莧菜黃酮的吸附特性。靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)鐵莧菜黃酮的吸附pH為4,上樣液濃度為1.25m
4、g/mL時(shí),有較好的吸附率和解吸率,由靜態(tài)動力學(xué)過程考查得出,聚酰胺樹脂吸附鐵莧菜黃酮的類型為快速吸附型,聚酰胺樹脂能在60min之內(nèi)達(dá)到吸附平衡。通過Langmuir方程擬合吸附等溫方程,具較好擬合度,Langmuir:Ce/qe=0.0349Ce+0.023(R2=0.925)。當(dāng)上柱液流速為1.5mL/min,上柱液體積為30mL時(shí),聚酰胺樹脂對鐵莧菜黃酮達(dá)到吸附飽和,最佳洗脫劑濃度為30%。
3、以VC為陽性對照,建立
5、不同的化學(xué)反應(yīng)體系,分別檢測鐵莧菜不同極性部位黃酮的總還原力,以及清除二苯代苦味酰基苯肼自由基(DPPH·),超氧陰離子自由基(O2-·)和羥基自由基(·OH)的作用大小。結(jié)果表明,鐵莧菜不同極性部位黃酮在各反應(yīng)體系中還原力和清除作用均有不同,乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有良好的抗氧化作用,還原力分別達(dá)到0.726和0.644,超過抗壞血酸,其中乙酸乙酯對DPPH·和·OH的清除作用達(dá)到81.83%和88.83%,大于抗壞血酸,而醇提物和
6、極性較大水相的最大還原力和自由基清除作用與抗壞血酸相比,表現(xiàn)出較低的抗氧化能力。
4、選取體外抗氧化活性較高的乙酸乙酯相的鐵莧菜黃酮作為體內(nèi)抗氧化活性的研究對象,考查乙酸乙酯相中的鐵莧菜黃酮對D型半乳糖致昆明小鼠衰老的活性作用,試驗(yàn)過程中,定期稱量小鼠體重,并檢測小鼠血清、心、肝、腎中丙二醛(MDA)的含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)的活性,結(jié)果表明,與陰性對照組相比
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