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文檔簡介
1、龍眼是我國南方主要的亞熱帶水果之一,具有很高的營養(yǎng)價值和保健價值?,F(xiàn)代藥理研究表明,龍眼果肉具有抗衰老、降血脂、抗癌、抗氧化等生物活性。本研究系統(tǒng)地研究了龍眼多糖的提取、分離純化工藝,并對龍眼多糖的結(jié)構(gòu)和體外抗氧化活性進行了初步探索。
本研究采取超聲波輔助法提取龍眼多糖,在單因素的基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面分析方法對龍眼多糖提取工藝進行優(yōu)化,其最佳提取條件為:浸提溫度60℃,超聲波功率161.414W,浸提時間31.111min,
2、液料比19.9697,多糖浸提率的理論最大值為19.96%。超聲波輔助提取法比傳統(tǒng)熱水提取法的多糖浸提率略高,綜合考慮時間和能耗等因素,采用超聲波輔助提取較好。為了分離、純化龍眼多糖,本研究首先采用Sevag法、TCA法脫蛋白,并對這兩種方法的脫蛋白效果進行了比較,然后對樹脂脫色、雙氧水脫色和活性碳脫色工藝進行研究,結(jié)果表明,TCA法的脫蛋白效果較好,可達到79.18%,大孔吸附樹脂XDA-1的脫色效果明顯優(yōu)于雙氧水脫色和活性碳脫色。在
3、此基礎(chǔ)上,采用DEAE-纖維素柱層析和Sephadex G-100柱層析對龍眼多糖進一步純化,結(jié)果分離出三個龍眼多糖組分并分別命名為LPS-1-A、LPS-1-B和LPS-2,其中,在LPS-2洗脫曲線范圍內(nèi)還檢測到一個較小的蛋白質(zhì)洗脫峰,表明LPS-2可能是一種糖-蛋白復(fù)合物。紫外光譜分析、凝膠柱層析及凍融實驗均表明LPS-2是一種均一多糖。由于LPS-1-A、LPS-1-B含量較少,后續(xù)試驗僅對LPS-2進行研究。
紅
4、外光譜分析結(jié)果表明LPS-2是一種具乙酰氨基結(jié)構(gòu)的β型吡喃多糖。利用氣相色譜法對混合標準單糖和LPS-2水解衍生物進行分析,結(jié)果顯示LPS-2是一種酸性雜多糖,由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖和半乳糖組成,摩爾比為鼠李糖:阿拉伯糖:木糖:半乳糖=1:2.59:4.43:2.25。利用硫酸-咔唑法對LPS-2的糖醛酸含量進行測定,結(jié)果表明LPS-2的糖醛酸含量較低,僅為4.3%。本研究從清除1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH·)、羥基自由
5、基(·OH)和超氧陰離子(O-2·)三個方面分別對龍眼粗多糖(CLPS)、Sevag法脫蛋白制得的龍眼粗多糖半純品(SLPS)、TCA法脫蛋白制得的龍眼粗多糖半純品(TLPS)和LPS-2的抗氧化能力進行初步研究。結(jié)果顯示,龍眼多糖對DPPH·和·OH有較強的清除能力,而對O-2·的清除效果不明顯;其中,多糖純度越高,清除DPPH活性也越強;對于·OH和O-2,SLPS活性最強,LPS-2活性最弱,說明雜蛋白抑制了清除·OH、O-2·活
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