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文檔簡介
1、目的:探討成體大鼠脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)在促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)的作用下體外分化的形態(tài)學(xué)表現(xiàn),為成體脊髓源性NSCs移植治療脊髓損傷提供理論基礎(chǔ)。
方法:利用無血清懸浮培養(yǎng),體外分離培養(yǎng)SD大鼠脊髓源性NSCs,隨后以含血清培養(yǎng)基貼壁誘導(dǎo)分化培養(yǎng)7d,行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,以抗巢蛋白(Nestin)鑒定NSCs,以膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibril
2、lary acidic protein,GFAP)以及抗微管相關(guān)蛋白2(microtubule associated protein,MAP2)檢測NSCs向神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞方向的分化情況。選取第3代 NSCs,向培養(yǎng)基中添加 EPO,使 EPO的終濃度為10IU/ml,并設(shè)不添加EPO的對照組,免疫熒光共聚焦顯微鏡下分別觀察并計數(shù)各組神經(jīng)元/細(xì)胞總數(shù)得出百分率。
結(jié)果:SD大鼠脊髓組織體外懸浮培養(yǎng)可獲得大量神經(jīng)球,所獲得
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