1、目的：本研究旨在探索FoxM1/ADAM17對人腦膠質(zhì)瘤細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用，探明FoxM1/ADAM17/EGFR作用環(huán)路的活化機制，為腦膠質(zhì)瘤的臨床診斷、治療提供新的策略。
　　方法：（1）應用熒光定量PCR、Western blotting和免疫熒光分別檢測4種人腦膠質(zhì)瘤細胞株中FoxM1、ADAM17、間質(zhì)表型標志物（FN、N-ca、vimentin、YKL-40）、上皮表型標志物E-ca的mRNA、蛋白表達水平；（2）應用

2、CCK8（Cell Counting Kit-8）法、平板細胞克隆形成實驗分別評價細胞增殖能力、克隆形成能力；（3）應用劃痕實驗和Transwell遷移實驗、成骨誘導和成脂誘導實驗分別檢測細胞的遷移能力、成骨、成脂分化潛能，評價人腦膠質(zhì)瘤細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化能力；（4）應用雙熒光素酶報告基因、點突變技術(shù)、染色質(zhì)免疫共沉淀法（ChIP）探明FoxM1對ADAM17表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制；（5）用Western blotting、基因轉(zhuǎn)染等手段分析Fo

3、xM1/ADAM17/EGFR作用環(huán)路中上下游分子的變化，探明FoxM1調(diào)控膠質(zhì)瘤間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機制。
　　結(jié)果：（1）SW1783和LN229細胞中FoxM1、ADAM17表達水平低于U251MG和U87MG細胞，間質(zhì)表型標志物表達水平也明顯低于U251MG和U87MG細胞，間質(zhì)表型標志物表達水平與FoxM1/ADAM17的表達水平呈正相關(guān)；（2）在SW1783和LN229中分別過表達FoxM1或ADAM17，可使細胞相對增殖率

4、、克隆形成能力、遷移率、成骨和成脂分化潛能增強，細胞上皮表型標志物E-cadherin表達水平降低，間質(zhì)表型標志物表達水平明顯升高；而在U251MG和U87MG中分別下調(diào)FoxM1或ADAM17的表達，細胞增殖率、克隆形成能力、遷移率、成骨和成脂分化潛能降低，細胞上皮表型標志物E-cadherin表達水平升高，間質(zhì)表型標志物表達水平明顯下降；(3)在SW1783中過表達FoxM1，ADAM17的mRNA、蛋白表達水平均顯著升高，而在U8

5、7MG中下調(diào)FoxM1的表達，ADAM17的mRNA、蛋白表達水平均顯著降低，且過表達FoxM1可增強ADAM17啟動子所介導的熒光素酶活性，突變所預測的FoxM1-ADAM17啟動子結(jié)合位點-1190至-1183、-1136至1129、-968至-961以后， ADAM17啟動子所介導的熒光素酶活性均顯著減弱。過表達FoxM1同時下調(diào)ADAM17的表達，F(xiàn)oxM1促進膠質(zhì)瘤間質(zhì)轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象可被下調(diào)的ADAM17所抑制；而下調(diào)FoxM1表

6、達的同時過表達ADAM17，下調(diào)FoxM1表達所引起的抑制膠質(zhì)瘤間質(zhì)轉(zhuǎn)化的現(xiàn)象可被過表達的ADAM17所挽救；（4）在膠質(zhì)瘤細胞中，F(xiàn)oxM1通過ADAM17激活了EGFR/AKT通路，從而磷酸化GSK3β（S9）；（5）ADAM17通過EGFR/AKT通路磷酸化GSK-3β（S9）使其失活，從而維持了FoxM1在膠質(zhì)瘤細胞中的穩(wěn)定性。
　　結(jié)論：（1）FoxM1/ADAM17途徑促進膠質(zhì)瘤細胞生長；（2）FoxM1通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控A