低強(qiáng)度脈沖超聲波對(duì)鈦酸鋇-碳化硅壓電陶瓷復(fù)合材料成骨作用影響的體內(nèi)外研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  從體內(nèi)體外兩個(gè)方面研究低強(qiáng)度脈沖超聲(low intensity pulsed ultrasoundstimulation,LIPUS)對(duì)碳化硅(silicon carbide,SiC)及鈦酸鋇/碳化硅((bariumtitanate/silicon carbide,BaTiO3/SiC,BT/SiC)復(fù)合壓電材料成骨作用的影響,探究LIPUS能否激發(fā)鈦酸鋇(BaTiO3)的壓電效應(yīng)而進(jìn)一步提升BT/SiC復(fù)合材料的成

2、骨作用,為L(zhǎng)IPUS下壓電效應(yīng)的研究和BaTiO3壓電陶瓷作為骨修復(fù)材料的研究提供有效數(shù)據(jù)。
  方法:
  1.分組:將SiC,BT/SiC材料隨機(jī)分為超聲組U(BT/SiC),USiC,對(duì)照組C(BT/SiC),CSiC,另設(shè)置空白組C與超聲空白組UC,保證每組樣品數(shù)量不低于3。分別在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組表面進(jìn)行小鼠前成骨細(xì)胞(mouse embryoosteoblast precursor cells,MC3T3-E1)的接

3、種和培養(yǎng),超聲組接受1次/d的超聲輻照,對(duì)照組接受1次/d的不開(kāi)電源假輻照。
  2.噻(硅)藍(lán)(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法分析LIPUS對(duì)兩種材料及空白孔上成骨細(xì)胞增殖的影響。
  3.堿性磷酸酶(alkaline phosphatese,ALP)含量測(cè)定法分析LIPUS對(duì)材料及空白孔上成骨細(xì)胞分化的影響。
  4.選用體重相近的10只健康成年大耳白兔,雙側(cè)下頜骨全麻下手術(shù)制

4、備全層骨缺損模型并植入BT/SiC。術(shù)后連續(xù)3d肌注抗生素,第1d開(kāi)始超聲加載,一側(cè)下頜骨術(shù)區(qū)接受每天20 min的超聲輻照,LIPUS參數(shù)為頻率1 MHz,強(qiáng)度為30 mW/cm2,脈沖寬度為1 ms,脈沖重復(fù)頻率為100 Hz。另一側(cè)接受不開(kāi)電源的假輻照。
  5.制作硬組織切片,染色:在6w和9w時(shí)取材并制作硬組織切片,保證最終切片厚度為30~40μm,用甲苯胺藍(lán)、亞甲基藍(lán)-酸性品紅兩種染色方法進(jìn)行染色。
  6.骨組

5、織形態(tài)學(xué)觀察與面積定量分析:將兩種染色結(jié)果在光學(xué)顯微鏡下觀察,觀察材料內(nèi)骨面積與骨成熟度。在顯微鏡下定量分析并計(jì)算成骨面積。
  以上所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示。組間比較使用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行單因素方差分析和T檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
  結(jié)果:
  1.MTT檢測(cè)結(jié)果顯示:MTT檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn)各組的MC3T3-E1細(xì)胞數(shù)量均隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增多。第1,4,7d,SiC材料組

6、均高于無(wú)材料的空白組(C),并且在4,7d其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。第1,4,7d,兩組材料之間比較,BT/SiC均高于SiC,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。第1,4,7d,超聲組均高于相應(yīng)的非超聲組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  2.ALP檢測(cè)結(jié)果顯示:ALP檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn)各組的MC3T3-E1細(xì)胞的ALP值均隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而提高。第1,4,7d,SiC材料組均高于無(wú)材料的空白組(C),并且其差異具

7、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。第1,4,7d,兩組材料之間比較,BT/SiC均高于SiC,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。在第1d,超聲組與相應(yīng)的非超聲組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;在第4,7d,超聲組均高于相應(yīng)的非超聲組,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  3.骨組織形態(tài)學(xué)觀察:兩種染色結(jié)果均顯示材料內(nèi)有新生骨組織長(zhǎng)入,并且隨著時(shí)間延長(zhǎng)面積增多,骨質(zhì)成熟度也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而更加成熟。相同時(shí)間點(diǎn)的LIPUS組成骨面積與成熟度均高于

8、對(duì)照組。
  4.骨組織形態(tài)計(jì)量分析:對(duì)甲苯胺藍(lán)染色、亞甲基藍(lán)-酸性品紅染色切片進(jìn)行面積測(cè)量,可見(jiàn)相同時(shí)間點(diǎn)LIPUS組成骨面積大于對(duì)照組,兩組樣本的9w成骨面積也高于6w,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
  結(jié)論:
  1、LIPUS可以促進(jìn)BaTiO3/SiC復(fù)合材料的成骨作用。LIPUS激發(fā)了BaTiO3壓電效應(yīng),該效應(yīng)參與了骨生成。
  2、SiC可以促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化。BaTiO3/SiC復(fù)合材

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