相變型超聲分子探針物理殺傷肝癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、第一部分硫酸腦苷脂修飾的液-氣相轉(zhuǎn)變型超聲分子探針的制備及相變研究
  目的:制備一種新型納米級(jí)超聲分子探針—硫酸腦苷脂修飾的包裹全氟戊烷的脂質(zhì)納米粒,研究其熱致相變及聲致相變效果。
  方法:采用薄膜分散法制備硫酸腦苷脂修飾的包裹全氟戊烷(PFP)的脂質(zhì)納米粒(SL-NP),使用光學(xué)顯微鏡觀察其形態(tài)、大小、分布等物理特征;采用激光粒度儀測(cè)SL-NP的粒徑;在加熱板加熱情況下使用光學(xué)顯微鏡觀察SL-NP液-氣相轉(zhuǎn)變情況,用低

2、強(qiáng)度聚焦超聲(LIFU)輻照SL-NP乳液后使用超聲診斷儀觀察SL-NP的聲致相變(ADV)情況。
  結(jié)果:制備的硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質(zhì)納米粒,其外觀成白色乳液,圓球形,密度高,大小均一,分散均勻,不成團(tuán)聚集,平均粒徑約為(182.7±63.8)nm;當(dāng)加熱板溫度升至44.5℃時(shí),SL-NP開(kāi)始出現(xiàn)液-氣相轉(zhuǎn)變,隨著溫度繼續(xù)升高,相變納米粒體積繼續(xù)增大,直至破裂,同時(shí)出現(xiàn)新的相變納米粒并逐漸增大。經(jīng)LIFU輻照后,普通

3、二維超聲及超聲造影模式下均顯示脂質(zhì)納米粒回聲較輻照前明顯增強(qiáng)。
  結(jié)論:成功制備納米級(jí)超聲分子探針—硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質(zhì)納米粒,并在加熱及超聲輻照下可發(fā)生液-氣相轉(zhuǎn)變。
  第二部分相變型超聲分子探針物理殺傷肝癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究
  目的:探討硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質(zhì)納米粒聯(lián)合低強(qiáng)度聚焦超聲對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞的殺傷作用。
  方法:采用薄膜分散法制備不含硫酸腦苷脂的包裹PFP的脂質(zhì)納米粒(N

4、SL-NP)和SL-NP;使用倒置熒光顯微鏡觀察SL-NP及NSL-NP與肝癌HepG2細(xì)胞結(jié)合情況,將肝癌細(xì)胞分為靶向組(SL-NP組)、非靶向組(NSL-NP組)、空白對(duì)照組(不含L-NP組),使用LIFU(參數(shù)3W,2min)分別對(duì)各組進(jìn)行輻照,爾后使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況,CCK-8檢測(cè)各組細(xì)胞存活情況。
  結(jié)果:制備的NSL-NP外觀成白色乳液,圓球形,密度高,大小均一,分散均勻,不成團(tuán)聚集,與SL-NP相比

5、物理特性相似;倒置熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)靶向組中SL-NP與肝癌HepG2細(xì)胞緊密結(jié)合,非靶向組中NSL-NP很少與肝癌HepG2細(xì)胞結(jié)合;經(jīng)LIFU處理后,靶向組肝癌細(xì)胞凋亡率最高,為(95.86±1.96)%,存活率最低,為(49.21±3.04)%,與其他組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  結(jié)論:硫酸腦苷脂修飾的包裹PFP的脂質(zhì)納米粒聯(lián)合低強(qiáng)度聚焦超聲可促進(jìn)肝癌HepG2細(xì)胞死亡,抑制其增殖,有望成為治療肝癌的一種

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