刀額新對蝦主要致敏原的分離純化與鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、食物過敏作為一類食源性疾病已引起了人們的普遍關(guān)注。過敏性疾病已被世界衛(wèi)生組織列為二十一世紀(jì)重點防沫的三大類疾病之一,是當(dāng)前世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問題。食物過敏作為一類常見的過敏性疾病,引起的臨床癥狀主要有頭暈、頭痛、胸悶、惡心、嘔吐、皮膚痙癢等,嚴(yán)重時還會休克甚至死亡。因此,開展食物(特別是海產(chǎn)品)的過敏原研究對保護(hù)人們生命健康,提高人民生活質(zhì)量具有巨大的經(jīng)濟效益和社會效益。 蝦蟹等甲殼類動物及其制品是人類優(yōu)質(zhì)動物蛋白的來源之一,也

2、是八大類容易引起過敏的食物之一。隨著國際貿(mào)易的發(fā)展,其在食品中的應(yīng)用越來越廣泛,食用蝦引起過敏的潛在危害更值得重視。本論文選用我國華南地區(qū)常見的食用蝦種,刀額新對蝦(Metapenaeusensis俗名基圍蝦),作為研究對象,主要從蝦過敏原蛋白的分離純化、純化產(chǎn)物的免疫學(xué)鑒定等方面進(jìn)行研究,得到如下結(jié)論: 首先,應(yīng)用SDS-PAGE技術(shù)對粗提蛋白液進(jìn)行初步分離,SDS-PAGE圖譜顯示刀額新對蝦粗提蛋白約有20條可辨蛋白帶,分子

3、量在12.1KDa~105.6KDa之間。利用12例蝦過敏患者血清通過免疫印跡(western-blotting)分析,初步鑒定出刀額新對蝦粗提液中有7條過敏蛋白條帶,其分子量分別為36KDa、46.2KDa、60KDa、64.8KDa、68KDa、78KDa和88.5KDa。另外還有21.6KDa的蛋白也被個別患者的血清識別,其中4條過敏蛋白條帶反應(yīng)率高,為主要致敏組分,分子量分別是36KDa、46.2KDa、60KDa和68KDa,

4、這與國內(nèi)外其他人的研究結(jié)果有一定差異,這可能與蝦的種類不同、各地區(qū)蝦類生長環(huán)境的不一致性以及過敏患者人群的個體差異有關(guān)。 其次,通過硫酸銨分段鹽析、DEAE-52離子交換層析和SephadexG-100凝膠柱層析等方法逐步純化了蝦過敏蛋白。并通過免疫印跡(western-blotting)、斑點酶聯(lián)免疫(dot-ELISA)、和酶聯(lián)免疫(ELISA)間接法對已經(jīng)純化的蝦過敏蛋白進(jìn)行了分析和鑒定。具有很高的反應(yīng)性。 本研究

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