1、先天免疫是機(jī)體對(duì)抗大部分細(xì)菌的主要免疫系統(tǒng)，而先天免疫防御最有效的策略就是控制體液中的鐵。同時(shí)，鐵也是細(xì)菌毒力和致病性的關(guān)鍵調(diào)控因子，細(xì)菌毒力及其致病性取決于其從宿主體內(nèi)獲取鐵的能力。但目前對(duì)鐵調(diào)控細(xì)菌毒力的分子機(jī)制并未完全闡明。近年發(fā)現(xiàn)廣泛存在于革蘭氏陰性細(xì)菌的外膜孔蛋白OmpW為一多功能蛋白，它不僅促進(jìn)細(xì)菌耐受多種不利環(huán)境，也促進(jìn)細(xì)菌抗先天性免疫作用，與細(xì)菌毒力及致病性相關(guān)，而且研究表明OmpW的表達(dá)量的變化與鐵離子有關(guān)，但目前鐵調(diào)

2、控OmpW的詳細(xì)機(jī)制尚未闡明。
　　本研究首先通過(guò)Western blotting發(fā)現(xiàn)，在不同鐵離子濃度下OmpW的表達(dá)發(fā)生改變，證實(shí)OmpW受鐵離子調(diào)控。進(jìn)而通過(guò)構(gòu)建重組載體pACYC184-ompW，并轉(zhuǎn)化ompW基因敲除菌（ΔompW）得到ompW基因補(bǔ)救菌（+ompW）。經(jīng)菲洛嗪洛比色法分析正常菌、ΔompW和+ompW攝取鐵離子差異，表明ΔompW菌攝入的鐵離子較多，而K12和+ompW對(duì)鐵離子的攝入較少，推測(cè)OmpW可

3、能與鐵離子攝取有關(guān)。此外，利用Real-Time qPCR檢測(cè)正常和限鐵條件下轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)限鐵下轉(zhuǎn)錄因子Fur表達(dá)量下調(diào)，而SoxS沒(méi)有明顯改變，表明Fur可能參與鐵對(duì)OmpW的調(diào)控。為進(jìn)一步確定轉(zhuǎn)錄因子的作用，運(yùn)用載體pET-28a(+)構(gòu)建了轉(zhuǎn)錄因子的高表達(dá)菌，然后利用Real-Time qPCR和Western blotting檢測(cè)OmpW的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)Fur高表達(dá)菌中OmpW的表達(dá)量上調(diào)，而SoxS高表達(dá)菌中Omp