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文檔簡介
1、哺乳動物的受精是由一系列精卵質(zhì)膜的相互作用而觸發(fā)的,包括:精卵識別、精卵結(jié)合和精卵質(zhì)膜融合。其中精卵質(zhì)膜融合是受精過程最為關鍵的步驟,但其機制目前尚未明了。本研究運用商業(yè)化抗ERp29 多克隆抗體和間接免疫熒光組織化學及蛋白免疫印跡技術,發(fā)現(xiàn)BALB/c小鼠附睪頭部、尾部的精子及頂體反應后的精子中存在ERp29;ERp29 含量隨精子在附睪運行過程顯著增加,主要定位于附睪頭部精子的頭部前端,而在附睪尾部精子則主要定位于整個頭部和尾部主段
2、;精子發(fā)生頂體反應后,ERp29 又定位于精子頭部的赤道部和頂體后區(qū)。在原核生物中成功克隆表達了小鼠重組ERp29,并經(jīng)純化后免疫家兔制備出相應的抗小鼠重組ERp29多克隆抗體。運用制備的抗體進行BALB/c小鼠穿卵實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn):該多克隆抗體能夠顯著抑制小鼠無透明帶卵細胞的受精率和受精指數(shù),且其抑制受精指數(shù)呈劑量依賴性。此外,檢測了經(jīng)抗體處理后的精子運動參數(shù)和頂體反應率,發(fā)現(xiàn)抗體對精子運動和頂體反應無明顯影響。綜上所述,ERp29存在
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