內質網蛋白57(ERp57)調節(jié)大鼠精卵融合過程的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、哺乳類動物卵母細胞成熟是卵泡發(fā)生過程中的重要步驟,通常指卵母細胞恢復減數分裂以及進一步發(fā)育到第二次減數分裂的過程。在此過程中,卵細胞內某些蛋白的表達與分布呈現時空特異性,在卵泡發(fā)生、受精和胚胎植入等方面發(fā)揮著重要的作用。在前期研究中,我們首次發(fā)現了內質網蛋白57(endoplasmic reticulum protein 57,ERp57)在大鼠卵母細胞中表達,且其含量隨著卵母細胞的成熟而增高。ERp57屬于蛋白二硫鍵異構酶(prote

2、in disulfide isomerase,PDI)家族成員的一員,近期有文獻報道該蛋白也存在于小鼠精子膜上,可能參與精卵的融合過程但與小鼠卵細胞無關,因此,我們設想,ERp57是否為大鼠精子和卵細胞共同擁有?如成立的話,大鼠精子和卵細胞是否又同時參與了精卵的融合過程?
   根據上述設想,我們選用SD大鼠作為實驗動物,首先在原核生物中成功克隆表達了大鼠重組ERp57,并經純化后免疫家兔制備出相應抗重組ERp57的多克隆抗體。

3、其次,運用商品化的ERp57抗體和自制的抗rERp57抗體,通過間接免疫熒光組織化學及蛋白免疫印跡技術研究發(fā)現,大鼠成熟精子和卵細胞都存在ERp57蛋白。ERp57主要定位于附睪尾部精子的頂體部位、頂體反應后定位于精子的赤道區(qū),而卵母細胞則定位在細胞表面。第三,運用自制的抗rERp57抗體檢測ERp57對精子穿卵實驗的影響,結果發(fā)現:該多克隆抗體能夠顯著抑制大鼠去透明帶卵細胞的受精率(Fertilization Rate,FR)和受精指

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