1、重型顱腦損傷(SHI)后胃腸功能障礙的發(fā)生率高達80％,不僅制約早期腸內(nèi)營養(yǎng)的實施、導(dǎo)致患者營養(yǎng)不良和免疫力低下,還會引起腸道菌群紊亂、細(xì)菌易位,誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS),甚至多器官功能障礙綜合征(MODS)。因此,早期防治SHI后胃腸功能障礙對降低相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生率具有重要意義。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),益生菌能改善SHI后的胃腸功能障礙、促進胃腸動力恢復(fù),但其作用溫和。基礎(chǔ)及臨床研究表明,大承氣湯(DCQD)的促胃腸動力效果顯著

2、,且具有保護腸黏膜屏障的作用,但其攻下之力頗峻,易使患者出現(xiàn)瀉下不止甚至發(fā)生陰血虧虛,制約了其在創(chuàng)傷患者中的應(yīng)用。據(jù)此我們推測,大承氣湯與益生菌聯(lián)合應(yīng)用,能否有促進胃腸動力恢復(fù)、保護腸黏膜屏障、防止細(xì)菌易位的作用,同時又具有改善腸道菌群紊亂,防止大承氣湯瀉下過猛的作用,更好地發(fā)揮兩者在改善SHI患者胃腸功能方面的作用。本實驗旨在觀察大承氣湯與嗜酸乳桿菌(LA)聯(lián)合應(yīng)用在SHI小鼠胃腸功能恢復(fù)方面的作用效果,期望二者的聯(lián)合應(yīng)用可以為臨床改

3、善SHI后胃腸功能提供新思路。
　　方法:
　　將150只雄性C57BL/6小鼠按照隨機數(shù)字表法分為假傷組、生理鹽水(NS)組、DCQD組、LA組、DCQD+LA組、1/2DCQD+LA組。假傷組只開骨窗不進行打擊,其余各組均按照改良自由落體法建立SHI模型。每只小鼠每日灌胃兩次,其余時間自由飲食水。DCQD組:灌胃量為0.4ml/d。LA組:喂菌量不低于1×1010cfu/d。DCQD+LA組:先給予大承氣湯,4h后喂菌,

4、用量同DCQD組和LA組。1/2DCQD+LA組:大承氣湯用量減半,LA用法同DCQD+LA組。假傷組和NS組:喂等量生理鹽水。分別干預(yù)1d、3d、7d后檢測血漿二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、胃動素(MTL)的含量,以及腸上皮occludin蛋白的表達量、小腸ICC數(shù)量,觀察ICC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和腸神經(jīng)-ICC-平滑肌(ENS-ICC-SMC)網(wǎng)絡(luò)形態(tài)的變化。
　　結(jié)果:
　　1.大承氣湯聯(lián)合嗜酸乳桿菌對SHI小鼠腸黏膜屏障的影

5、響
　　1.1.Western blot檢測腸上皮occludin蛋白表達量變化與NS組相比,DCQD+LA組在SHI后1d、3d、7d的occludin蛋白表達量均顯著升高,1/2DCQD+LA組只在傷后1d升高(P<0.05)。
　　1.2.血漿DAO和D-乳酸含量變化 LA組、DCQD組和DCQD+LA組DAO傷后3d、7d的含量較NS組顯著降低(P<0.05)。LA組和1/2DCQD+LA組D-乳酸傷后1d、3d的含

6、量較NS組降低(P<0.05);DCQD組和DCQD+LA組D-乳酸傷后1d、3d、7d的含量均顯著低于NS組(P<0.05)。
　　2.大承氣湯聯(lián)合嗜酸乳桿菌對SHI小鼠胃腸動力的影響
　　2.1.透射電鏡技術(shù)觀察小腸ENS-ICC-SMC網(wǎng)絡(luò)形態(tài)變化 SHI后,NS組神經(jīng)纖維束明顯減少,平滑肌細(xì)胞腫脹,結(jié)構(gòu)被破壞,ICC突起明顯減少或消失,與周圍神經(jīng)纖維束和平滑肌細(xì)胞連接松散,ENS-ICC-SMC網(wǎng)絡(luò)形態(tài)嚴(yán)重受損;各用

7、藥組的上述情況均有所改善,且DCQD+LA組和1/2DCQD+LA組可見相對完整的網(wǎng)絡(luò)形態(tài)。
　　2.2.免疫熒光染色法觀察小腸ICC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)及數(shù)量變化
　　2.2.1.ICC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)假傷組ICC網(wǎng)絡(luò)密集;NS組網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)被破壞,網(wǎng)絡(luò)明顯變稀疏,分支較假傷組少。各用藥組ICC網(wǎng)絡(luò)較NS組明顯變致密,且DCQD+LA組用藥7d時的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)密集程度與假傷組無明顯差異。
　　2.2.2.ICC數(shù)量變化與NS組相比,DCQD組、

8、LA組和1/2DCQD+LA組傷后7d的c-kit陽性細(xì)胞數(shù)量增多(P<0.05);DCQD+LA組傷后1d、3d、7d的陽性細(xì)胞數(shù)量也明顯升高(P<0.05),且其傷后1d、7d的陽性細(xì)胞數(shù)量較DCQD組和1/2DCQD+LA組均增加(P<0.05)。
　　2.3.血漿MTL含量變化與NS組比較,LA組傷后1d血漿MTL含量顯著升高(P<0.05);傷后3d,DCQD+LA組高于NS組和DCQD組(P<0.05);傷后7d,DC

9、QD組MTL含量較NS組、LA組(P<0.05)和DCQD+LA組(P<0.01)均高。
　　結(jié)論:
　　1.SHI后腸上皮緊密連接蛋白occludin表達下降,腸黏膜屏障受損、通透性增高,血漿DAO和D-乳酸含量升高;大承氣湯聯(lián)合嗜酸乳桿菌與單獨用大承氣湯或嗜酸乳桿菌相比,能更好的提高SHI小鼠occludin蛋白的表達,修復(fù)腸黏膜屏障,降低腸黏膜通透性。
　　2.SHI后ICC數(shù)量減少、網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)破壞,ENS-ICC