1、基因表達是遺傳信息的轉錄和翻譯過程，可以在不同的水平上進行調控。其中，轉錄水平的調控是表達水平調控的關鍵環(huán)節(jié)，也是當前研究的重點。C/EBPs(CCAATenhancer binding proteins)是一類與DNA增強子區(qū)域結合的轉錄因子家族，C/EBPβ是該家族的一個重要成員，其C端具有高度保守的DNA結合域和二聚化功能域。它主要通過對靶細胞基因轉錄的調節(jié)，參與細胞增殖與分化、腫瘤發(fā)生與凋亡、細胞周期調控等重要生命活動。C/EB

2、Pβ的異構體之一LIP不具有N端的激活功能域，只有C端的DNA結合域。在體外，野生型的LIPwt的DNA結合能力很低，而其突變體LIPM(Thr179/188Asp)卻具有很強的DNA結合能力，其機制目前還沒有報道。為了研究LIPwt和LIPM與DNA結合能力的差異，我們計劃用NMR技術來研究其相關的復合物三維溶液結構，以期解釋其機理。本論文工作側重于前期的蛋白質制備與初步的功能研究，主要內容分為兩部分：
　　 (1)LIPwt

3、和LIPM蛋白樣品制備與純化：利用分子克隆技術，構建了含SUMO標簽的pSMT3/LIPwt和pSMT3/LIPM重組表達質粒。將構建的質粒轉化到宿主菌Rossetta(DE3)中，從誘導溫度、誘導劑IPTG的濃度和誘導時間等方面對目的蛋白可溶性表達條件進行了優(yōu)化。為了獲得大量而穩(wěn)定的目的蛋白，在純化蛋白時，進行了緩沖液、不同層析方法的篩選，解決了蛋白穩(wěn)定性差的問題。目的蛋白經過親和鎳柱、CM離子交換柱和凝膠過濾色譜純化，最終得到了符合